文档介绍:第2章细胞培养的条件
影响细胞生长的因素
细胞的营养
第一节细胞的营养
离体细胞与体内的细胞在营养代谢上是有
区别的。机体内的细胞营养可受神经和激
素等进行一系列的统一调节,而离体的细
胞则不受其调节。
体外培养细胞的生长所需的基本营养物
质,除碳水化合物、氨基酸和脂类三大类
营养物质外,也需要一定量的无机盐、维
生素和微量元素等。
一、水
(1)水是一种良好的溶媒。营养物质只有溶
于水Æ吸收;代谢产物也需溶于水Æ排泄。
(2)水的比热高、潜热大Æ调节温度
( 3 ) 水中有溶解氧的存在Æ供细胞呼吸
( 4 )水有一定的表面张力,对生物形态的保
存也有一定作用.
纯净水系统
对细胞培养用水的要求:
必须经过2~3次玻璃器皿蒸馏或者
用离子交换树脂处理的水。这样的
水含杂质少、纯度高,应用起来安
全可靠。一般在电导仪上表示
200~300万Ω以上方可使用,生长
液要在500万Ω以上。
二、糖
(1)葡萄糖是机体活动能量的主要来源
(2)维持渗透压
三、氨基酸
氨基酸是组成蛋白质的基本单位。
(1)12种基本氨基酸:精氨酸、组氨酸、异亮氨
酸、亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、色氨
酸、苏氨酸、缬氨酸、胱氨酸及酪氨酸。
(2)谷氨酰胺对细胞具有特殊作用:1、转氨基Æ
天门冬氨酸、天门冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、谷氨
酸、丙氨酸;2、可合成嘌呤、嘧啶Æ利于细胞代
谢;3、是合成ATP的必须物Æ提供能源。(3)有
时细胞培养还加以下7种氨基酸,即天门冬氨酸、
天门冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸、
羟脯氨酸(非必须氨基酸)。
(4) 半胱氨酸的主要作用是保护酶的活力,可消
除培养液中的微量金属与细胞内酶结合后形成的
抑制硫苷酸,利于细胞增生增寿、改善细胞外
形。
(5) 甘氨酸对细胞的大量生长有一定的促进作用
(转氨基作用)
(6)丝氨酸对肿瘤和成纤维细胞有促进生长的作用
(7)色氨酸的主要作用是可通过转氨基作用产生
丙、甘、酪氨酸
四、维生素
(1)酶的辅酶和辅基的组成部分,对细胞的代谢有
重大的影响,某些维生素缺乏,短期可引起细胞
死亡。如生物素、叶酸、胭酰胺、泛酸、吡多
醇、核黄素、硫胺素及B12等。
(2)维生素C也是不可少的,是氧化还原剂,
具有递氢作用,利于细胞生物氧化还原作用,其
他脂溶性维生素(A、D、E、K等)对细胞生长
也有作用,它们常从血清中得到补充。
补加白蛋白、谷胱甘肽、核酸和糖代谢中间物对
细胞生长有益
五、无机离子和微量元素
(1)钠:维持渗透压,可使细胞外质溶胶化粘度下
降,细胞内粘度上升,增加组织细胞的应激性与
增高细胞膜的渗透性,有利于细胞内外物质的转
运。
(2)钾:钾是激活细胞内某些酶所必需的。缺钾
细胞变圆,胞质内颗粒增加,细胞界限不清楚,
并产生一种特殊的树枝形细胞,24小时后细胞脱
落死亡。
(3)钙钙对维持细胞膜的坚固和渗透性,对保
持神经和肌肉组织的正常兴奋性有很大作用。许
多酶必须有钙的存在才有活性。钙对细胞粘着性
和贴壁能力也很重要。