文档介绍:生物制药工艺基础
生物活性物质的提取
提取是利用制备目的物的溶解特性,将目的物与细胞的固形物成分或其它结合成分分离,使其由固相转入液相或从细胞生理状态转入特定溶液环境的过程。
一、物质性质与提取(一)物质的性质与提取方法的选择
要取得好的提取效果,最重要的是要针对生物材
料和目的物的性质选择合适的溶剂系统与提取条
件。
生物材料及其目的物与提取有关的一些性状
包括溶解性质、分子量、等电点、存在方式、稳
定性、比重、粒度、粘度,目的物含量,主要杂
质种类及溶解性质,有关酶的特征等。其中最主
要的是目的物与主要杂质在溶解度方面的差异以
及它们的稳定性。
操作者可根据文献资料及本人的试验摸索获得的有关信息,在提取过程中增加目的物的溶出度,尽可能减少杂质的溶出度。
(二)活性物质的保护措施(1)采用缓冲盐系统在生物药物制备中,常用的缓冲盐有磷酸缓冲盐,柠檬酸缓冲盐,Tris缓冲液,醋酸缓冲盐,碳酸缓冲盐,硼酸缓冲盐和巴比妥缓冲盐等。
2)添加保护剂     -巯基乙醇。对易受重金属影响的,可添加EDTA。防止某些生理活性物质的活性基团及酶的活性中心受到破坏,如巯基是许多活性蛋白质和酶催化活性基团,极易被氧化,故提取时,常添加某些还原剂如半胱氨酸。
3)抑制水解酶的作用
二、物质的性质与溶解度(一)物质溶解度的一般规律    相似相溶(二)水在生化物质提取中的作用水是提取生化物质的常用溶剂。水分子的存在可使其它生物分子之间的氢键减弱,而与水分子形成氢键,水分子还能使溶质分子的离子键解离,这就是所谓的水合作用。水合作用促使蛋白质、核酸、多糖等生物大分子与水形成了水合分子或水合离子从而促使它们溶解于水或水溶液中。
三、提取效率
(4)其它保护措施(冷、热、酸、碱)
四、影响提取的因素
(一)温度 多数物质的溶解度随提取温度的升高而增加。另外较高的温度可以降低物料的粘度,有利于分子扩散和机械搅拌,所以对耐热成分的提取可以用加热的方法。对不耐热的生物活性物质的提取,一般在0~10℃进行提取。
(二)酸碱度
多数生化物质在中性条件下较稳定,pH值一般应控制在4~9范围内,为了增加目的物的溶解度,往往要避免目的物的等电点附近进行提取。       巧妙地选择溶剂系统的pH值不但直接影响目的物与杂质溶解度,还可以抑制有害酶类的水解破坏作用,防止降解,提高收率。。
(三)盐浓度
盐溶作用
盐析作用