文档介绍：实验二 离体蛙心灌流实验
专业: 学号: 姓名:
实验目的
1、学习离体器官(蛙心)灌流的方法。
2、观察理化因素对蛙心活动的影响。
实验原理
蛙心的灌流:蛙心无营养性血管,离体之后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间,心肌的营养就是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
心肌:
受体
受体激动剂
效应
β1
肾上腺素
去甲肾上腺素
心率增快、房室传导加速、心肌收缩力加强。
M
乙酰胆碱
心率减慢、房室传导减慢、心肌收缩力减弱。
1、任氏液:正常对照
含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4
与蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0、65%NaCl灌流:
3、2%CaCl2灌流:
4、1%KCl灌流:
5、1:10000 E 灌流
6、1:10000 Ach灌流
7、心得安
β1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作用。
8、阿托品
M受体阻断剂,抑制Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力。
实验器材
离体蛙心
任氏液、l％KCl溶液、2％CaC12溶液、0、65%NaCl溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品
实验步骤
1、离子试剂
任氏剂
0、65%NaCl
任氏液清洗
2%CaCl2
任氏液清洗
1%KCl
任氏液
2、药物试剂
E
任氏液清洗
心得安+E
任氏液清洗
Ach
任氏液清洗
阿托品+Ach
任氏液
结果与分析
心率:34次/min
最大收缩力:2、5g
最小收缩力:1、1g
图1 正常脉搏曲线
心率:35次/min
最大收缩力:1、6g
最小收缩力:1、1g
图2 0、65%NaCl灌流脉搏曲线
分析:细胞外液中Ca2+浓度降低,2期Ca2+内流减少,胞浆中Ca2+减少,心肌收缩力降低。
心率:38次/min
最大收缩力:3、5g
最小收缩力:1、1g
图3 2%CaCl2灌流脉搏曲线
分析:心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发达,储钙能力差,易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外液中Na+与Ca2+有竞争性抑制,细胞外液Ca2+浓度升高,细胞兴奋时内流Ca2+增加,心肌收缩力增强。慢反应细胞4期去极速度加快,心率增快。
心率:21次/min
最大收缩力:3、4g
最小收缩力:1、1g
图4 1%KCl灌流脉搏曲线
分析: K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中K+浓度升高,K+抑制细胞膜对Ca2+转运,因此进入细胞内Ca2+降低,心肌的兴奋—收缩耦联作用减小,心肌收缩力减弱。
心率:35次/min
最大收缩力:3、5g
最小收缩力:0、9g
图5 肾上腺素灌流脉搏曲线
分析:肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合,心肌细胞与肌浆网膜Ca2+通透性增强,肌浆中Ca2+浓度升高,心肌收缩力增强。而且肾上腺