文档介绍：酵母培养操作规程
本文主要介绍酵母的选育、保种、培养的操作工艺等。
目         录
第一章  酵母扩培…………………………………………………………………(2)
§1-1 实验室扩培…………………………………………………………………(2)
    1培养基制备……………………………………………………………………(2)
    2接种操作………………………………………………………………………(3)
§1-2  生产现场扩培  ……………………………………………………………(5)
    1准备工作………………………………………………………………………(5)
    2汉生罐接种操作………………………………………………………………(5)
    3扩大罐扩培……………………………………………………………………(5)
    4二次(车间)扩大罐扩培……………………………………………………(6)
第二章菌种保藏…………………………………………………………………(7)
    1实验室菌种保藏与活化……………………………………………………(7)
    2汉生罐菌种保藏与活化……………………………………………………(7)
第三章酵母检测…………………………………………………………………(8)
§3-1  取   样……………………………………………………………………(8)
    1扩培液、发酵液及待滤酒等的取样…………………………………………(8)
    2酵母泥的取样…………………………………………………………………(8)
§3-2  检   测…………………………………………………………………(10)
    1酵母细胞形态检测……………………………………………………………(10)
    2酵母细胞大小测定……………………………………………………………(10)
    3酵母泥外观检测………………………………………………………………(11)
    4酵母细胞数和出芽率的测定(血球计数板法) ……………………………(11)
    5酵母死亡率的测定(血球计数板法)…………………………………………(12)
    6酵母肝糖染色法……………………………………………………………(13)
    7酵母凝聚性的测定…………………………………………………………(14)
    8酵母死灭温度的测定……………………………………………………………(15)
    9酵母发酵失重实验……………………………………………………………(16)
    10酵母的呼吸缺陷型检测………………………………………………………(16)
第一章  酵母扩培
§1-1  实验室扩培
1培养基制备
【试剂】:冷麦汁、蒸馏水、新鲜鸡蛋。
【器具】:试管(15×150)及(18×180)、小巴氏瓶(三角瓶)、大巴氏瓶(大三角瓶)、卡氏罐、中速滤纸、电炉、量筒、不锈钢锅、糖度计等。
【仪器】:杀菌锅、天平()。
【方法】
〖试管、三角瓶及巴氏瓶培养基的制备〗
①        取样:取糖化冷却麦汁,视麦汁浊度情况判定是否进行过滤。
2℃,~1L使用一个鸡蛋的比例,加入打成泡沫的蛋清,在不断地搅拌下保温30min;然后升温煮沸30min;将煮沸后的麦汁用水浴冷至80~90℃,用双层中速滤纸过滤。±②        澄清:将麦汁加热至45
°P。±③        调糖:将过滤后的麦汁用蒸馏水调整糖度为11
④        分装:试管(15×150)5mL,试管(18×180)10mL,分装小巴氏瓶(三角瓶)、大巴氏瓶(大三角瓶)。
⑤        灭菌:分装后包扎好,115℃杀菌20min;杀菌后培养基放置2~3天,确定无菌后备用。
        
〖卡氏罐培养基的制备〗
   取糖化冷却麦汁(有条件的可取薄板前热麦汁)加入卡氏罐,然后封闭卡氏罐取样口,各呼吸阀等接口处均应以棉塞或呼吸阀进行封闭后包扎结实,115℃杀菌30~40min,于室温冷却至17~18℃;接种前以3L/min的速率充纯氧2~3min(卡氏罐有效容积20L)。
2接种操作
【器具】:酒精灯、酒精棉、剪刀、接种针、镊子、定量移液器或吸管等。
【仪器】:超净工作台等。
【方法】
无菌室使用前,使用紫外线灯照射20~30分钟进行杀菌;进入无菌室换无菌工作服;所有操作采用无菌操作。
〖活化〗
①