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分子生物学复制.pptx

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分子生物学复制.pptx

上传人:wz_198613 2021/3/18 文件大小:4.03 MB

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文档介绍

文档介绍:一、半保留复制
Semi-conservation replication
以每条链为模板,按碱基互补配对原则由DNA聚合酶催化合成新的互补链。
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二、复制起点和复制子
Origin of replication (ori) and replicon
DNA复制从特定位置开始,即复制起点,然后向两边进行复制。
原核生物DNA分子为一个复制子;而真核生物每个DNA分子有多个复制子,每个复制子长约50-200kb。
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二、复制起点和复制子
Origin of replication (ori) and replicon
复制起点有特殊的序列结构:
A. 反向重复序列,即回文结构(palindrome),与复制酶系统的识别有关;
B. 启动子序列。
C. 呼吸区序列
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三、半不连续复制
Semi-discontinuous replication
DNA生物合成方向为5'→3'延伸合成。
在复制起点向两侧复制形成两个复制叉(replication forks)。
前导链(leading strand)的合成是连续的;后续链(lagging strand)以冈崎片段(Okaxaki fragments)的形式分段合成,再连接。
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四、参与DNA复制的酶与蛋白
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螺旋酶 (Helicase)
利用ATP的能量,促使DNA在复制叉打开为单链。
E. coli中一种为螺旋酶I或螺旋酶III,与后续链的模板DNA结合沿5'→3'方向运动;第二种为Rep蛋白,和前导链的模板DNA结合沿3'→5'方向运动。
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2 单链DNA结合蛋白(SSBP)
E. coli的SSBP为四聚体,可结合32 bp。
SSBP使单链DNA呈伸展状态,有利于单链DNA作为模板。
SSBP防止单链DNA重新配对或被降解。
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催化DNA不同超螺旋状态之间的转变。
A. 拓扑异构酶I :双链解旋 切断形成“酶-DNA“共价中间物  DNA连接。不需辅助因子。
B. DNA旋转酶(DNA gyrase):拓扑异构酶II,引入DNA分子负超螺旋 。需要ATP。
DNA拓扑异构酶 (Topisomerase)
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