文档介绍:HPLC法测定盐酸多奈哌齐口腔崩解片相关物质盐酸多奈哌齐口腔崩解片
摘 要:目标:建立高效液相色谱法测定盐酸多奈哌齐口腔崩解片相关物质的方法。方法:采取Welchrom-C185?m,*250mm色谱柱,梯度洗脱;检测波长286nm柱温为50℃,流速为/min,进样量为20ul,溶剂为乙***-水1:3。结果:在该色谱条件下,盐酸多奈哌齐和各中间体、杂质分离良好,辅料对相关物质检测无干扰。结论:该方法专属性强、灵敏度高、反复性好,可用于该制剂中相关物质的检测。
关键词:盐酸多奈哌齐片 相关物质 高效液相色谱法
盐酸多奈哌齐Donepezil hydrochloride的化学名为1-苄基-45,6-二甲氧基-1-茚满***-2-基***哌啶盐酸盐是诊疗阿尔茨海默病的第2代胆碱酯酶AchE酶抑制剂,能够增加大脑乙酰胆碱含量,是诊疗早、中期老年性痴呆的有效药品1,2。现在各国药典中还未收载该品种的相关物质检验方法,我国文件亦还未报道。为有效控制产品质量,本文采取高效液相色谱HPLC法3,参考相关文件4,5对盐酸多奈哌齐口腔崩解片中相关物质进行了检测,结果该方法专属性强、灵敏度高、反复性好,可用于该制剂中相关物质的检测。
一、仪器和试药
岛津液相色谱仪LC-10ATvp泵,SPD-10Avp紫外检测器,CBM-10Avp系统控制器
盐酸多奈哌齐对照品中国药品生物制品检定所,批号:100650-202101,含量:%;盐酸多奈哌齐口腔崩解片山东方明药业集团股份有限企业,批号:20210301、20210302、20210303,规格:5mg;盐酸多奈哌齐杂质对照品A、 B、C、D、E均为试剂,乙***、磷酸为色谱纯;水为纯化水。
二、方法和结果
色谱柱为Welchrom-C18柱5μm,*250mm,流动相A为%磷酸溶液,流动相B为乙***:水=5:3按表1进行梯度洗脱;检测波长为286nm,柱温为50℃;进样量:20μl,溶剂为乙***-水1:3。
供试品溶液 取本品的细粉适量约相当于盐酸多奈哌齐25mg,精密称定,置25ml量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液 精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,加溶剂稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加溶剂稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。
杂质对照品溶液 精密称取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E适量,加溶剂溶解并稀释制成每1ml各含的溶液,作为杂质对照品溶液。
测定波长的选择
取盐酸多奈哌齐对照品、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、空白辅料适量,用流动相溶解并稀释至约25μg/ml,参考紫外-可见分光光度法于200~400nm波长间扫描,结果显示多奈哌齐对照品、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、空白辅料在286nm处吸收强度基础相当吸收系数比为1:1,辅料基础无吸收不干扰相关物质测定,故选择286nm为相关物质检测波长较为适宜。
专属性考察
破坏性试验:取样品适量,经酸、碱、氧化、高温、光照破坏后,按项下色谱条件进行测定,统计色谱图。结果表明,本