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电泳技术概论.ppt

文档介绍

文档介绍:电泳技术概论
讲授人:牛颜冰
电泳是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象
正极
负极
带负电粒子
带正电粒子
第一节基本原理
迁移率(或泳动度)是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度,可用下列公式计算:
U =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/Vt
U为迁移率(cm2·V-1·min-1);υ为颗粒泳动速度(cm·s-1);E为电场强度(V·cm-1);d为颗粒泳动的距离(cm);l为滤纸有效长度(cm);V为实际电压(V);t为通电时间(s或min)。通过测量d, l, V, t, 即可计算出被分离物质的迁移率。
1迁移率单位= 10-5 cm2·V-1·min-1
在确定的条件下,某物质的迁移率为常数,是该物质的化学特征常数
颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则泳动速度慢。
迁移率还与分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,迁移率与颗表面电荷成正比,与介质粘度及颗粒半径成反比。
影响电泳速度的外界因素

2 .溶液的pH值




影响电泳速度的外界因素
电场强度也称电位梯度,是指单位长度(每一厘米)支持物体上的电位降,它对泳动速度起着十分重要的作用。
一般,电场强度越高,带电颗粒移动速度越快。
影响电泳速度的外界因素
溶液的pH值决定了带电颗粒解离的程度,也决定了物质所带净电荷的多少。
影响电泳速度的外界因素
电泳液中的离子增加会使电泳迁移率降低,原因是带电的离子会吸引相反符号的离子聚集在其周围,相成一个与运动粒子符号相反的离子氛(ionic atmosphere),它使该离子向相反的方向运动,从而降低了该粒子的迁移率。
离子的这种阻碍效应是与其浓度和价数相关的。用离子强度来表示,它的数值如下式:
式中s表示共有s种离子,Ci和Zi分别代表每种离子的浓度(mol/L)和价数。