文档介绍：IGF- Ⅱ基因启动子***化状态与肝癌发生关系研究钱静姚登福南通大学附属医院临床医学研究中心研究背景?肝细胞癌(HCC) 是与慢性病毒感染密切相关?流行病调查,我国目前约 9 300 万乙肝病毒携带者,约 4 000 万丙型肝炎病毒感染者。?预后差, 5年生存率约 11% 。遗传学遗传学??基因突变基因突变??基因杂合丢失基因杂合丢失??微卫星不稳定微卫星不稳定原癌基因激活抑癌基因失活肝癌表观遗传学表观遗传学?? DNA DNA ***化***化??组蛋白修饰组蛋白修饰??染色体重塑染色体重塑肝癌发病机制肝癌发病机制 DNA ***化原理 DNA ***化主要发生在 CpG 二核苷序列的胞嘧啶上胰岛素样生长因子Ⅱ( IGF- Ⅱ) ? IGF- Ⅱ是一种与肿瘤形成密切相关的促有丝分裂原,在细胞增殖、分化、糖代谢调节方面有重要作用。? IGF- Ⅱ在胎肝和新生儿肝脏中基因有大量表达,但出生后基因迅速降低直至关闭,肝细胞癌变时 IGF2 Ⅱ呈胚胎性过量表达,并具有强烈的致有丝分裂剂作用,参与肿瘤细胞增生及分化。 IGF- Ⅱ基因启动子与基因表达的关系 E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 P 1P 2P 3P 4人P 2 IGF -Ⅱ信号途径与肝癌 IGF- Ⅱ IRS SHC ppppp p PI3K Akt Ras Raf MAPK IGF- ⅠR Proliferation Survival Metastasis IGF- Ⅱ IGF- Ⅱ实验目的本研究动态观察鼠肝细胞癌变过程中 IGF- Ⅱ基因启动子***化状态改变及其与 IGF- Ⅱ基因表达的关系; 同时分析人不同肝组织中 IGF- Ⅱ基因启动子***化状态及与临床病理学特征之间的关系,探讨 IGF- Ⅱ启动子***化状态改变在 HCC 形成中的作用机制。材料和方法以2-乙酰氨基芴( 2-FAA )喂饲雄性 Sprague-Dawley ( SD )鼠诱发肝细胞癌变,通过病理组织学方法( HE 染色)观察肝细胞形态学动态变化; 以***化特异性聚合酶链反应( MSP )检测鼠 IGF- Ⅱ基因 P2 ***化状态;以酶联免疫吸附法( ELISA )定量检测鼠外周血和肝组织 IGF- Ⅱ基因的蛋白表达水平; 以 MSP 检测人类肝细胞癌、癌旁以及正常肝脏组织 IGF- Ⅱ基因 P3 ***化状态。