第七章 色谱技术 [Chapter 7 Chromatography].ppt

文档介绍：Chapter 7色谱技术Chromatography
本章主要知识点
什么是色谱分离技术?
色谱分离技术的分类
什么是色谱柱的理论塔板数以及如何计算?
吸附色谱及其分类和基本原理
什么是分配色谱?
离子交换色谱的分类及应用
凝胶色谱的分离原理及分类
离子交换及疏水作用层析的原理
高效液相色谱的分离原理及应用
蛋白质分离的常用色谱方法有哪些?
色谱技术(分配色谱)
概念:色谱技术是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相(多孔介质)和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同(由于亲和力差异),经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸…),达到分离的目的。
色谱分离方法的分类
色谱分离方法很多,种类有四、五十种
但常用于生物大分子分离的色谱方法,按机理分,
有以下几种:
吸附色谱
分配色谱
离子交换色谱
凝胶色谱
色谱系统的基本组成
色谱分离的基本概念
分配系数
可由Langmuir方程得出
Kd---分配系数
q、c---溶质在固相和液相中的浓度
保留时间(tR)和保留体积(VR)
反应样品在柱子中的保留或阻滞能力,是色谱过程的基本热力学参数之一
阻滞因子Rt
阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物(与固定相没有亲和力的流动相 Kd=0)的迁移率之比
其意义在于体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大小
洗脱体积
色谱柱中,使溶质从柱中流出所需流动相体积,为洗脱体积
不同的溶质,由于和固定相的亲和力的不同,洗脱体积也有所差异