WESTERNBLOT操作步骤图.ppt

文档介绍：WESTERN BLOTTING过程图解
WESTERNBLOT操作步骤图
图中绿色的是夹玻璃片的架子
WESTERNBLOT操作步骤图
玻璃板对齐后放入架中，把两侧的夹子卡紧。要使短玻璃靠外，长玻璃靠内。
WESTERNBLOT操作步骤图
然后垂直卡在架子上准备灌胶。操作时要使两玻璃对齐，以免漏胶。 图示两块玻璃板放在一个架子上。
WESTERNBLOT操作步骤图
配10％分离胶，加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时，可用10ml枪吸取5ml胶沿玻璃放出，待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水，液封后的胶凝的更快。（灌胶时开始可快一些，胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下，这样胶中才不会有气泡。加水液封时要很慢，否则胶会被冲变型。）
WESTERNBLOT操作步骤图
当水和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝了。再等3min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。
按前面方法配4％的浓缩胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。
WESTERNBLOT操作步骤图
均匀插入梳子
WESTERNBLOT操作步骤图
梳子已经插好。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小，从而使加样孔的上样体积减小，所以在浓缩胶凝固的过程中要经常在两边补胶。
WESTERNBLOT操作步骤图
浓缩胶干后，用手拿住梳子的两边均匀用力，拔起梳子
WESTERNBLOT操作步骤图
将玻璃板从夹子上取下，用水冲一下
WESTERNBLOT操作步骤图