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新生大鼠海马神经干细胞体外培养与诱导分化研究.pdf

文档介绍

文档介绍:广西医科大学
硕士学位论文
新生大鼠海马神经干细胞的体外培养与诱导分化的研究
姓名:黎海燕
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:罗杰峰
20070601
缩略语骨形成蛋白中文名称碱性成纤维细胞生长因子脑源性神经营养因子泛塑账崃姿岫中枢神经系统睫状神经营养因子二氨基联苯氨胶质细胞系源性神经营养因子胶质纤维酸性蛋白英文缩写英文名称表皮细胞生长因子胎牛血清异硫氰酸荧光素羟乙基哌嗪乙硫磺酸胰岛素样生长因子白细胞抑制因子神经细胞黏附分子神经上皮干细胞蛋白神经干细胞神经元特异烯醇化酶—籬籩,鵾瓹届硕士研究生毕业论文新生大鼠海马神经干细胞的体外培养与诱导分化的研究
多聚赖氨酸嫦赴磷酸盐缓冲盐溶液血小板衍生性生长因子前脑室下区酪氨酸羟化酶托切徒褐氏赴—.‘。!疞新生大鼠海马神经干细胞的伴夕卜培养与诱导分化的研究届硕士研究生毕业论文
论文作者签名:鬻治移论文作者签名:磊漏乳日期:∥哕日期:祇《校工作期间,论文工作的知识产权单位属广西医科大学。本人保证在校期间和离校后,发表或使用论文工作成果时署名第一作者单位均为广西医科大学。学校有权保留论文,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德,本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加哄标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切责任。本人完全了解广西医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在校攻读学位期间,博士后工作人员、人才小高地工作人员在保护知识产权说明,
中文摘要培养和扩增的方法,并鉴定神经干细胞;教稚窬上赴谔迥谕庠胞化学法检测曛疚颪谋泶锛胺只笙赴窬L匾煨韵┐蓟触的情况共培养,每更换一次培养基,免疫细胞化学染色法观察星型胶的无血清的神经干细胞基础培养液中,能形成大量悬浮的神经干细胞球,目的:⒓虮恪⒁仔械耐巧笫蠛B砩窬谙赴的分离殖、分化的特点,并从局部微环境角度来探讨神经干细胞的发生与分化机制,为细胞体内移植研究奠定基础。方法;有律笫蠛B碇蟹掷隢,采甩寺⌒》ǎ∮/嘌海砑游扪G迮嘌砑蛹罛肿碱性成纤维细胞生长因子及表皮细胞生长因子刑逋饫┰雠嘌岛鸵让赶的方法分离连续传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态,并采用免疫细酶⒔褐氏宋嵝缘鞍,ɑ泛烁仕崃姿岫的表达;鄄痬ǘ认碌腷对鲋车挠跋欤妹庖哂光染色和流式细胞仪分选细胞法观察,陨窬上赴只I窬元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的影响;捎没Хā⒉钏偬诜和振荡法分离纯化星型胶质细胞,用免疫细胞化学染色法,标记星型胶质细胞,进行细胞纯度的鉴定;将星型胶质细胞接种在着嘌逯校待细胞均匀长满后,换神经干细胞基础培养液,置于培养箱孵育有母遣F湃孔板中,将神经干细胞球种到盖玻片上,在互不接质细胞源性因子对神经干细胞分化后屠野彼狒腔泶的影响。结果:有律笫蠛B矸掷氲南赴诤猩ひ蜃觔駿流式细胞仪的结果表明这些干细胞球可在体外扩增及传代培养,经免疫细胞化学鉴定,抗体标记阳性,分化后的细胞表达神经元、星型胶质届硕士研究生毕业论文新生大鼠海马神经干细胞的体外培养与诱导分化的研究
体标记阳性,细胞纯度达%:切徒褐氏赴肷窬上赴才嘌保诱导嘞蛏窬7只珽则诱导嘞蚪褐氏赴只细胞、少突胶质细胞的特异性抗原;庖哂ü馊旧ê土魇较赴欠盅细胞显示能明显增加谋泶,,抗神经干细胞贴壁分化加快,经免疫组化染色鉴定,:芄淮有律笫蟮暮B碇蟹掷氤鼍哂心茏晕腋隆⒕哂性殖能力和多分化潜能,表达蛋白的干细胞,该类细胞属于中枢神经系统的于细胞,该方法简便易行,是进行诱导分化的良好细胞模型;星型胶质细胞能诱导神经干细胞向神经元,包括多巴胺神经元分化,这一神经发生通路从一个新的角度阐明神经发育机制,也提供了~个快速而有效获得大量神经元的方法。关键词;神经干细胞:细胞培养;分化;星型胶质细胞届硕士研究生毕业论文新生大鼠奄马神经千细胞的体外培养与诱导分化的研究
螩—/,琣—琣瑆—、,甀髇,届硕士研究生毕业论文新生大鼠海马神经干细胞的体外培养与诱导分化的研究
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新生大鼠海马神经干细胞的体外培养的研究第一部分材料引言细胞“’。胚胎和

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