文档介绍：DNA的粗提取与鉴定
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一、课题重点与难点
课题重点：DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
课题难点：DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
二、基础知识分析
（一）DNA的提取原理
1、DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
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问题思考与讨论：
①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图，思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？
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当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L时，DNA的溶解度最大，浓度为 0．14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出？
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DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离
2、DNA在酒精溶液中的溶解性
3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响
②大多数蛋白质不能忍受60－80°C的高温，而DNA在80°C以上才会变性
③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响
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（二）、DNA的鉴定原理
① DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂
②甲基绿 （绿色）
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三、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（一）实验材料的选取
1、材料：鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。（从中选取2～3种实验材料）
2、原则：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但选用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大
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不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。你认为上述提供的材料中哪些不适合提取DNA？
从核DNA数目来看，猪38条，鸡78条，哺乳动物血0条，猕猴桃58条，洋葱16条，豌豆14条，菠菜12条，大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。
哺乳动物的血液和液体培养基中的大肠杆菌。
鸡血、猕猴桃。
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动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞
讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？
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