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文档介绍

文档介绍:分子生物学实验技术目录实验一细菌的培养........................................................................................................................... 2 实验二质粒 DNA 的提取.............................................................................................................. 3 实验三紫外吸收法测定核酸浓度与纯度...................................................................................... 4 实验四水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA ............................................................................. 5 实验五质粒 DNA 酶切及琼脂糖电泳分析鉴定............................................................................ 7 实验六植物基因组 DNA 提取、酶切及电泳分析...................................................................... 8 实验七聚合酶链反应( PCR )技术体外扩增 DNA ................................................................... 9 实验八 RNA 提取与纯化............................................................................................................. 11 实验九 RT-PCR 扩增目的基因 cDNA ......................................................................................... 13 实验十质粒载体和外源 DNA 的连接反应.................................................................................. 15 实验十一感受态细胞的制备及转化........................................................................................ 16 实验十二克隆的筛选和快速鉴定................................................................................................ 18 实验十三 DNA 分析—— Southern 杂交....................................................................................... 19 一基本操作实验一、细菌培养实验二、质粒 DNA 提取实验三、紫外吸收法测定核酸浓度与纯度实验四、水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA 实验五、质粒 DNA 酶切及琼脂糖电泳分析鉴定实验六、植物基因组 DNA 提取、定量、酶切及电泳分析实验八、植物 RNA 提取及纯化二、目的基因获取实验七、聚合酶链式反应( PCR )技术体外扩增 DNA 实验九、 RT-PCR 扩增目的基因 cDNA 三、目的基因的克隆和表达实验十、质粒载体和外源 DNA 的连接反应实验十一、感受态细胞的制备及转化实验十二、克隆的筛选和快速鉴定实验十三、 DNA 分析—— Southern 杂交实验一细菌的培养一、目的学****细菌的培养方法及培养基的配置。二、原理在基因工程实验和分子生物学实验中, 细菌是不可缺少的实验材料。质粒的保存、增殖和转化;基因文库的建立等都离不开细菌。特别是常用的大肠杆菌。大肠杆菌是含有长约 3000kb 的环状染色体的棒状细胞。它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。当大肠杆菌在培养基中培养时, 其开始裂殖前, 先进入一个滞后期。然后进入对数生长期,以 20~30min 复制一代的速度增殖。最后, 当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到