文档介绍:5 比色法测定食品中N-亚硝胺类
食品中挥发性N-亚硝胺类化合物的测定,可采用气相色谱一质谱联用法、气相色谱一热能分析仪法及分光光度比色法。这里介绍分光光度比色测定法。
原理
本法主要是利用食品中挥发性亚硝胺可采用夹层保温水蒸气蒸馏加以纯化,在紫外光的照射下,亚硝胺分解释放亚硝酸根。通过强碱性离子交换树脂浓缩,在酸性条件下,与对位氨基苯磺酸形成重氮盐,再与M萘乙烯二胺二盐酸盐形成红色偶氮染料来测定。颜色的深浅与亚硝胺的含量成正比,此法可用于测定挥发性N一亚硝胺总量。
5. 2 试剂
(1)磷酸缓冲溶液(,pH7):/。
(2)300g/L乙酸溶液。
(3)。
(4)显色试剂
显色剂A——10g/L对氨基苯磺酸的300g/L乙酸溶液。
显色剂B——2g/L N一1一萘乙烯二胺二盐酸盐的300g/L乙酸溶液。
显色剂C——10g/。
显色剂D——l0g/L N-1一萘乙烯二胺二盐酸盐溶液。
(5)盐酸溶液()。
(6)二乙基亚硝胺标准溶液(100μg/mL)。
(7)亚硝酸钠标准溶液(100μg/mL)。
(8)强碱性离子交换树脂:交链度8,粒度150目。
(9)正丁醇饱和的1mol/L氢氧化钠溶液。
仪器
(1)分光光度计。(2)紫外灯。
操作步骤
(1)亚硝胺标准曲线的绘制
(2)样品制备
液体样品:~,移人100mL容量瓶中,加入氢氧化钠溶液使其浓度为1mL/L,摇匀后过滤,收集滤液待测定。
固体样品,,加入正丁醇饱和的lmol/L氢氧化钠溶液,移人100mL容量瓶中,并加至刻度,摇匀,浸泡过夜,离心分离,取清滤液待测定。
(3)挥发性N一亚硝胺的总量的测定
吸取样品的清液50mI。移人蒸