文档介绍：摘要目的探讨在体外诱导兔骨髓问充质干细胞向平滑肌细胞分化的的有效方法,以便为后续实验工作提供稳定的种子细胞来源。方法以密度梯度离心法白兔骨髓液获取骨髓间充质干细胞进行原代及传代培养,观察其形态学变化并鉴定。以T影铡⑵交∠赴嘌锨逡河盏技与平滑肌细胞共培养诱导等方法诱导其向平滑肌细胞分化,通过形态学观察及免疫组化方法比较各种诱导方法的诱导效率。结果原代培养的兔骨髓间充质干细胞形态较为均一,呈成纤维细胞样,生长增殖迅速,传代培养生长良好。培养的细胞经流式细胞仪鉴定,及表达很弱、而强表达,证明所培养的细胞为较纯的骨髓间充质干细胞。在各组诱导实验中,以T影沼盏技肮才嘌盏剂:洗碜橛盏甲樾首罡撸结论密度梯度离心结合贴壁筛选能获得较纯的骨髓间充质干细胞。T影及共培养诱导联合处理能有效地诱导其向平滑肌细胞分化。关键词:骨髓间充质干细胞;T影眨环只蛔橹こ单纯共培养诱导组与T影沼盏技吧锨逡河盏剂:洗碜榇沃橛盏率无显著差异,单纯以上清液诱导组效率最低。
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学位论文作者签名中:豫林滔签字日期:加雾签字同期:—旷年乙月归日学位论文作者签名中:洳体学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书签字日期:猫鲁年‘月工时妒年彭月本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。南昌大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者毕业后去向:本学位论文作者完全了解有关保留、使用学位论文的规定,进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。导师签名中:工作单位:通讯地址:电话:邮编:
第乱阴道是软产道的重要组成部分及女性性生活的重要器官,阴道缺失或缺损严重影响女性的生存质量。先天性无阴道或阴道闭锁及各种损伤或肿瘤切除后的盆腔清扫等造成的阴道缺失或缺损,以及女性假两性畸形或男性要求女性化者等都有阴道修复重建的要求。自年紫炔捎贸Χ谓幸醯涝造以来,不少学者进行了阴道再造的研究,多种自体、异体组织缙て⑵瓣、肌皮瓣、腹膜、肠袢、胎儿皮肤、羊膜挥糜谝醯涝僭欤捎谜庑┓椒再造的阴道,尽管能满足患者的一些要求,但仍存在一些不可避免的缺点,如:皮片再造的阴道术后有挛缩,需长期放置阴道模具;皮片及皮瓣再造的阴道较干燥无湿滑感;肠袢再造阴道手术术式复杂且再造的阴道分泌物多、有异味等,且自体组织移植是一种“以伤治伤”的方法,在修复阴道缺损的同时造成新的损伤,异体移植由于存在免疫排斥反应,移植组织通常只能充当暂时性覆盖物,术后亦需长期放置阴道模具【”】。这些都影响到术后患者的生活质量。因此,有组织工程学是应用细胞生物学和生物医学工程的理论和方法,将体外培养扩增的正常组织细胞吸附于一种生物相容性良好并可被机体吸收的生物材料上,然后将细胞一生物材料复合物植入体内的受损部位,细胞在生物材料逐渐被肌体降解吸收的过程中,形成在形态和功能上与受损组织和器官相一致的替代物,应用这种替代物进行修复或再造,从而达到在修复创伤重建功能的统一【。迄今,组织工程化骨、软骨、肌腱、皮肤、角膜基质、血管组织、心肌、瓣膜、口腔粘膜、膀胱、尿道和周围神经等许多组织已在具有完全免疫功能的自体哺乳动物体内成功构建,构建的组织在形态、组织结构、生化组织成分与生物力学强度等方面与正常组织十分接近,组织工程替代物在修复组织的同时等【将体外培养扩增的阴道粘膜上皮细胞和平滑肌韵录虺芐种植于Ъ苌铣晒Φ毓菇俗织工程阴道组织,证明了组织工程技术有望提供理想的替代物。然而研究中发现,和其它组织工程一样,种子细胞的问题是制约阴道组织工程发展的瓶颈。必要寻求一种更为理想的组织替代物用于阴道再造。功能亦得到重建【。年,细胞
化阴道所需的种子细胞一粘膜细胞、理论上可以由诱导分化而化,此即近年来的热点陧柩怠薄阴道粘膜细胞、来源有限,体外培养时增殖能力不强,多次传代后细胞功能易老化,所能获得的细胞数量不能满足构建阴道的需要。因此,阴道组织工程要进一步发展,必需首先解决种子细胞的问题。干细胞干细胞具有高度的自我更新能力和多向分化潜能,用作种子细胞可以避免上述缺点,是目前组织工程种子细胞研究的热点。胚胎干细胞是全能干细胞,可向机体各种组织分化,但其自身的免疫原性、取材困难及伦理道德等问题限制了它在临