文档介绍：实验五   粗脂肪的定量测定
 
第一法   抽提法
 
一、目的与要求:
1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。
2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。
二、原理:
本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物质为脂肪类物质的混合物,其中含有脂肪游离脂肪酸、磷脂\酯、固醇、芳香油某些色素及有机酸等。因此,称为粗脂肪。
三、试剂及仪器:
(1)无水乙醚
(2)海砂
(3)索氏提取器
(4)恒温水浴锅
(5)烘箱
(6)脱脂棉花
(7)脱脂滤纸
四、操作步骤
(一)样品的准备
    称取样品的重量根据材料中脂肪的含量而定,通常脂肪含量在10%以下的,称取样品10-12克;脂肪含量为50-60%的,则称取样品2-4克,(可以用测定水分后的样品)。
    将样品在80-100℃烘箱去水分。一般烘4小时,烘干时要避免过热。冷却后,准确地称取一定量样品,必要时,拌以精制海砂,无损地移入滤纸筒内,用脱脂棉塞严,将滤纸筒放人索氏提取器的提取管内,注意勿使滤纸筒高于提取管的虹吸部分。
    (二)抽取   
    ℃烘箱内烘干至恒重,加乙醚约达到提取瓶容积的1/2-2/3,然后将提取器各部分按图连接,注意不能漏气。
    加热提取时,应在电热恒温水浴中进行(水浴温度约为40-50℃)也可以使用灯泡或电炉加热的水浴锅,严禁用火焰直接加热索氏提取器。
在加热时乙醚蒸发,乙醚蒸汽由连接管上升至冷凝器,凝结成液体滴入提取管中,此时样品内的脂肪为乙醚液面超过虹吸管高度后溶有脂肪的乙醚虹吸管流入提取瓶,为此循环抽提,调解水域温度,使乙醚每小时循环3-5次,提出时间视样品的性质而定,一般需6-12小时,样品含有脂肪是否提取完全,可以用滤纸来粗略判断,从提取管内吸取少量的乙醚并滴在净的滤纸上,待乙醚干后,滤纸上不留有油脂的半点则表示已经提取完全。
提取完全后,再将乙醚蒸到提取管内,待乙醚液面达到虹吸管的最高处以前,取下提取管。
五、称重和计算
将提取瓶中的乙醚全部蒸干,洗净外壁,置于105℃烘箱干燥至恒重,按下式计算样品的促脂肪百分含量。
 
W1-W0
脂肪(﹪)---------×100
W
W1:接受瓶和脂肪重量(克)。
W:样品重量(克)。
W0:接受瓶重量(克)。
六、注意事项
(1)样品应干燥后研细,装样品的滤纸筒一定要紧密,不能往外漏样品,否则重做。
(2)放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则乙醚不易穿透样品,脂肪不能全部提出,造成误差。
(3)碰到含多量糖及糊精的样品,要先以冷水处理,等其干燥后联通滤纸一起放入提取器内。
(4)提取时水浴温度不能过高,一般使乙醚刚开始沸腾即可(约45℃左右)。回流速度以每8-12次/时为宜。
    (5)所用乙醚必须是无水乙醚,如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出,造成误差。
(6)用于样品测定脂肪,可按下式计算原来样品脂肪的含量.
   W1-W0
脂肪(﹪)------------(100-A)
W     
 脂肪(%)= 物的耐盐性得到不同程