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上传人:2024678321 2014/7/8 文件大小:0 KB

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绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养和诱导分化硕士论文.pdf

文档介绍

文档介绍:论文题目学校代码研究生:昱渔壹指导教师:佥咽副婴究员业:动物堂研究方向:生殖生物堂区生物撞丕’院:生金型堂堂院分类号密级编号学号专学二。一二年五月
~.堕鐾直奎兰学位论文作者签名:堆诩溲芯砍晒褂贸信凳原创性声明竺圭兰篁笙苎文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得内墓盘太堂及其他教育机构的学位或证本人声明:所呈交的学位论文是的研究工作及取得的研究成果。除本文已经注明引用的内容外,论书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。指导教师签名:本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位沦文的规定,即:内蒙占大学有权将学位论文的全部内容或部分保留并向国家有关机构、部门送交学位论文的复印件和磁盘,允许编入有关数据库进行检索,也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权,作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研究成果,须征得内蒙古大学就读期间导师的同意;若用于发表论文,版权单位必须署名为内蒙古大学方町投稿或公开发表。学位论文作者签名:日
绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养和诱导分化摘要因此,家畜骨骼肌卫星细胞体外培养模型的建立就显得特别迫切和重要。骨骼肌卫星细胞是成体肌源性干细胞,在各种成体干细胞研究中越来越受到人们的关注。虽然从一些物种缧∈蟆⒋笫蠛腿的骨骼肌中已经成功分离出卫星细胞,但对于家畜缗!⒚嘌的研究却很少。在家畜转基因的研究和生产过程中,需要在动物生产之前对转基因细胞系进行基因表达的鉴定和验证。本研究以绵羊骨骼肌卫星细胞作为研究对象,重点探讨卫星细胞的分离、纯化及体外培养方法,并对得到的细胞进行鉴定,旨在建立可稳定传代的绵羊卫星细胞系及其鉴定方法,为今后绵羊骨骼肌卫星细胞在家畜繁育和再生医学等相关方面的研究和应用提供实验依据。用两步酶消化法和差速贴壁法分离和纯化绵羊骨骼肌卫星细胞,并对其进行鉴定和诱导分化,分析其多能性。结果表明,%徒涸负.%胰蛋白酶两步消化法分离绵羊骨骼肌卫星细胞效率较高,含%%马血清的培养基更有利于绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养。用免疫组化和流式细胞术检测绵羊骨骼肌卫星细胞中几个标记基因蚉谋泶锴榭觯狙芯康到的细胞中这龌虮泶锞恃粜裕得鞣掷氲玫降南赴C嘌蚬趋兰∥佬细胞。为验证其多能性,将分离得到的卫星细胞向成肌、成脂和成骨三个方向诱、猄内蒙古大学硕士学位论文
导。成肌诱导后形成明显的多核肌管细胞,标记基因表达阳性,快肌肌球蛋白细胞免疫荧光染色呈阳性;成骨诱导后经茜素红和旧赴恃性,成骨细胞特异性基因泶镅粜裕怀芍盏己笙赴芪в忻飨缘脂滴出现,经挥秃烊旧ǔ恃粜裕襊泶锍恃粜浴K得鞅臼笛榈玫降细胞具有一定的多能性。本研究初步建立了绵羊骨骼肌卫星细胞体外分离、纯化、培养和鉴定的方法。关键词:绵羊;分离培养;骨骼肌卫星细胞;成肌诱导;成骨诱导;成脂诱导塑茎直奎兰堡主兰堡丝圣
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.钏偬诜ù炕嘌蜈⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第一章绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.牧稀主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯笛槭约良昂牟摹培养液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一绵羊睦涠潮4婕案此铡绵羊ぱ蜗卟舛ā绵羊庖哂ü馊旧ḿ癛ā琈,和的免疫组化检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ü馊旧ḿ癛ā绵羊魇较赴羌觳狻帧B佟结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二章绵羊骨骼肌卫星细胞诱导分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯牧稀主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..主要试剂及耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

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