实验一DNA琼脂糖凝胶电泳.pptx

文档介绍：实验一 DNA的琼脂糖凝胶电泳
概 述
1、迁移方向
2、影响迁移率的主要因素：
（1）DNA的分子大小
（2）琼脂糖的浓度
（3）DNA的构象
（4）电场强度
3、 未知DN***段的大小计算线性双链DNA分子，其迁移距离与碱基对数目以10为底的对数值成反比
已知分子大小的DNA标准物（DNA Marker）
可根据电泳样品预计的片段大小选择使用。
4、上样缓冲液（loading buffer）的使用
（1）倍数
（2）上样量少的时候可适当补充缓冲液或ddH2O
5、常用的电泳缓冲液及其组成
技术要点及注意事项
1、使用1×TAE配胶，50mL/2块
2、煮胶要充分，减少蒸发、避免糊底，稍凉即可加入Goldview（5-10μL/100mL）
3、倒胶时要避免产生气泡
4、待胶凝固完全后再拔出梳子
5、电泳槽一定不能短路
思 考 题
总结本实验操作的关键环节

经典失误集锦
1、使用50×TAE配胶
2、将DNA Marker误用做loading buffer
再 见 ！