文档介绍：实验一：大肠杆菌的培养和分离
微生物
结构简单,，有的甚至没有细胞结构。
特点：
种类：
病毒
无细胞结构
细菌：大肠杆菌、乳酸菌
放线菌
蓝藻（蓝细菌）
支原体、衣原体
真菌：霉菌、酵母菌
原生生物：变形虫、草履虫
原核细胞
真核细胞
大肠杆菌
革兰氏______（填阴或阳）性菌
阴
代谢类型：
异养，兼性厌氧型
人和哺乳动物肠道，此外还广泛分布于水、 污水、土壤、谷类、乳制品等当中。
分布：
大肠杆菌在人体的_____中一般对人体无害，但任何
大肠杆菌如果进入__________都会对人体产生危害。
大肠杆菌是_______工程中被广泛采用的工具。
肠道
泌尿系统
基因
有氧生长较好，无氧维持生存
液体培养基：
扩大培养
固体培养基：
菌种保存、分离纯化、鉴定、活菌计数等
半固体培养基
按照物理性质
按功能分
普通培养基
选择培养基：
筛选
鉴别培养基：
鉴定
按成分
合成培养基：
天然培养基：
人工按照需要配置
血清、血浆、组织液等
供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。
培养基
灭菌和消毒
灭菌：使用强烈的理化因素消灭物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
消毒：使用较温和理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的微生物的过程。不能杀死芽孢和孢子。
灭菌方法
培养基、无菌水、
各种耐高温的玻璃金属器具
100kPa、121 ℃下维持15-30min
需要保持干燥
耐高温的玻璃金属器皿
160-170 ℃下加热1-2h
接种环等金属器具
高压蒸汽灭菌
（湿热灭菌）
酒精灯灼烧灭菌
干热灭菌
消毒的方法
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;***气消毒水源
菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体。
大肠杆菌的培养和分离实验步骤
在两个250mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和50mL LB固体培养基（刚刚配好，尚未凝固）。
步骤一：
细菌喜荤，霉菌喜素
蛋白胨和酵母提取物，提供碳源和氮源；
***化钠，维持一定的渗透压；
用无机物或添加蔗糖的豆芽汁即可
中性偏碱；
中性偏酸；
LB液体培养基：蛋白胨，酵母提取物，***化钠，加水50mL
（固体培养基则再加入1g琼脂）
步骤二：
将LB液体培养基配好，加入琼脂并加热使之融化后，通过玻璃漏斗加入试管中，每试管2mL,加棉塞并将试管捆在一起，上端加盖一张牛皮纸。
步骤三：
灭菌
要求所利用的微生物不被其他微生物污染，因此在培养微生物时必须进行无菌操作