文档介绍：酶工程一、填空题:(每空 分,共 15 分) 1. 盐析法提取酶蛋白最常用的盐析剂是(硫酸铵); 2. 有机溶剂提取酶蛋白过程中最常用的有机溶剂有乙醇、***及丁醇; 3. 酶的显著特点有( 极高的催化效率)、( 专一性)、( 反应条件温和); 4. 酶发酵工艺条件控制中关于 pH 的调节, 细菌、放线菌的最适 pH为(中性偏碱 - ), 霉菌和酵母菌最适 pH为( 偏酸性 - ), 植物细胞的最适 pH 为( 5-6 ); 5. 在提高酶发酵生产菌种产酶能力时,诱变法所使用的诱变剂主要(酶的作用底物)、(酶的反应产物)、(酶的底物类似物)三类; 6. 酶发酵工艺条件控制中关于温度的调节, 枯草芽杆菌的最适生长温度为( 34-37 ℃), 黑曲霉的最适生长温度为( 28-32 ℃), 植物细胞的最适生长温度为 25℃左右; 7. 提高酶产量的措施有( 添加诱导物)、( 控制阻遏物浓度)、(添加表面活性剂)、(添加产酶促进剂); 8. 凝胶过滤层析混合液中各组分按照分子量由(大)到(小) 顺序先后流出层析柱。 9. 在使用交联法对酶进行固定化时,最常用的交联剂 10. 众多层析技术中,(亲和)层析选择性强,得到的目的酶蛋白纯度高; 11. 离心方法可分为(差速离心)、(密度梯度离心)、(等密度梯度离心)三种; 12. 菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素,除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大影响发酵条件一般包括( 添加诱导物)、(控制阻遏物)、(添加表面活性剂)及添加酶促进剂。二、名词解释:(每题 2 分,共 10 分) 1. 酶:由生物合成的具有催化功能的生物大分子; :酶促反应速率为最大速率一般时的底物浓度; 3. 固定化技术: 通过物理或化学的手段将酶或游离的细胞定位于限定的空间区域内,使其保持活性并可反复利用; 4. 酶分子修饰: 采用各种方法使酶分子的结构发生某些改变, 进而改变酶的某些功能和特性的技术称为酶分子修饰。 5. 电泳:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳三、简答题:(共 35 分) 1. 简述细胞破碎的方法;( 5 分) 答: ㈠机械破碎①研磨法②匀浆法③压榨法④超声波破碎法; ㈡非机械破碎法①溶涨法②冻融法③化学试剂法④酶溶法 2. 简述酶分子修饰的意义及方法;( 7 分) 答: ⑴意义: ①可以探索酶的结构与功能的关系; ②提高酶活力;③增强酶的稳定性; ④降低或消除酶的抗原性,改变酶的动力学特性⑵主要方法包括酶分子的金属置换修饰、大分子结合修饰、酶蛋白侧链基因修饰、氨基酸置换修饰、酶分子肽链有限修饰以及酶分子的物理修饰等。 3. 简述固定化酶的优点及酶固定化方法、细胞固定化方法、原生质体固定化方法( 10 分) 答: ㈠固定化酶的优点:①极高的催化速率;②专一性;③反应条件温和㈡酶固定化方法①吸附法②包埋法③共价偶联法④交联法㈢细胞固定化方法①吸附法②包埋法㈣原生质固定化方法①琼脂- 多孔醋酸纤维素固定化法②海藻酸钙凝胶固定化法③角叉菜固定化法④光交联树脂固定化法 4. 简要归纳酶的各种分离纯化方法及其分类。( 8 分)答:( 1 )差速离心; 差速离心是指采用不同的离心速度和离心时间, 使不同沉降速度的颗粒分批分离的方法。(2) 密度梯度离心; 密度梯度离心是样品