文档介绍：专题5 DNA和蛋白质技术
课题3 血红蛋白的提取和分离
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一、基础知识
蛋白质提取与分离的依据－－
蛋白质的物理化学性质差异
、大小
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血红蛋白的提取和分离
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：根据被分离物质（如蛋白质）相对分子质量的大小，利用具有多孔网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。
性质：微小的多孔球体
本质：多糖类化合物
实例：葡聚糖、琼脂糖
：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
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洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。
相对分子质量较大的先被洗脱出来，相对分子质量较小的后被洗脱出来。
混合物
上柱
洗
脱
大分子流动快
小分子流动慢
收集
大分子
收集
小分子
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缓冲溶液
1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的溶液。
2、作用：能够抵制外界的酸或碱的对溶液的pH的影响，维持pH基本不变。
3、配制：通常由1－2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
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1、概念：指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。
2、原理：
①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
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3、类型：
琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰***凝胶电泳
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