文档介绍：肠杆菌科细菌鉴定
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实验目的
掌握肠杆菌科细菌的基本特征和鉴定程序
掌握肠杆菌科细菌分类的鉴别试验
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菌种
埃希氏菌属：大肠
志贺氏菌属：福氏，宋内氏
变形杆菌属：普通变形
克雷伯菌属：肺炎
沙门氏菌属：伤寒、PA，PB
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肠杆菌鉴定程序
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实验内容
按检验程序操作（每人一种菌，8人一组）：
1、制作SS平板培养基(成分,原理见下一页)
2、在SS平板上分离接种各菌(大:红色菌落;其它为无色透明)
3、接种肠杆菌科生化：KIA，半固体（M），蛋白胨水（I），尿素（U），葡胨水（Mr），枸橼酸盐培养基（C），苯丙氨酸培养基
4、做GS染色
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SS平板培养基:选择性培养基,有促进目的菌生长的物质和鉴别用指示剂.
1煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等能抑制G+菌及大多数大肠生长，胆盐促进伤寒生长。
2大肠分解乳糖产酸：中性红（－
）变红，与胆盐结合合成胆酸，因而形成中心混浊的深红色菌落，病原菌不分解乳糖，故菌落呈透明微黄色。
3枸橼酸铁能指示硫化氢产生，硫化铁呈黑色
4硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺、沙门菌的毒害作用，并中和煌绿、中性红染料的毒性，使大肠红色鲜明
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动力试验：
原理：有动力的细菌在半固体培养基中沿穿刺线扩散生长。
培养基：半固体培养
方法：分别穿刺接种大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，37 ℃孵育16-18h
结果：穿刺线扩散，培养基透明度减低为动力阳性；穿刺线清晰，培养基透明为动力阴性。大肠+，肺杆--。
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吲哚试验：（靛基质试验）
原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚，与对二***氨基苯甲醛形成红色化合物。
培养基：蛋白胨水
方法：将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于蛋白胨水培养基中，37 ℃孵育16-18h
结果：取出后，滴加吲哚试剂2d，混匀，可见培养物上层呈玫瑰红色为+，不变色为--
大肠+，伤寒--
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尿素酶试验：
原理：产生尿素酶的细菌能分解尿素，形成氨，使培养基呈碱性，酚红指示剂变成红色。
培养基：尿素培养基
方法：将大肠埃希菌和变形杆菌分别接种于尿素培养基中，37 ℃孵育16-18h
结果：培养基变红色者为阳性。变黄为阴性。
大肠--，变形+
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***红试验：
原理：某些细菌分解葡萄糖产生***酸，***酸可进一步分解为甲酸、乙酸等，，加入***红指示剂后呈红色。有些细菌分解葡萄糖产生的酸进一步转化为其它物质，如醇、***等，，加入***红指示剂呈黄色。
培养基：葡萄糖蛋白胨水
方法：分别接种大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌
结果：加入***红指示剂2d，混匀，红色为阳性，黄色为阴性。大肠+，肺杆--
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