文档介绍：微生实验报告
姓名：王晶晖
专业年级：2011级生物技术
学号：040312011032
实验十一　细菌常用生理生化反应实验接种
一、实验目的
１．学****各种生理生化反应实验的原理
２．学****各种生理生化反应实验的接种方式并熟练掌握各种接种方法
二、实验原理
１．葡萄糖发酵实验原理：
糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳等）；产酸后溴甲酚紫指示剂可由紫色pH()变为黄色（），产气的细菌可使半固体培养基中存有气泡．
２．V. P. 反应和***红试验原理：
V. P. 反应：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生***酸，***酸脱羧通过缩合和脱羧后转变成乙酰***甲醇（亦称三羟基丁***），然后被还原为2，3－丁二醇，乙酰***甲醇在碱性条件下，被空气中的氧气氧化成为二乙酰，二乙酰再与蛋白胨中的精氨酸的胍基起作用生成红色化合物。此为V．P．正反应（若培养基中胍基太少，可加少量肌酸等胍基化合物）。在试管中加入α-萘酚时，可促进反应进行。
***红反应：某些细菌在糖代谢过程中，将培养基中的糖先分解为***酸，***酸再被分解为甲酸、乙酸、乳酸等。有机酸的产生可由加入***红指示剂的变色进行检测。***红变色范围为pH4．2（红）～6．3（黄）。细菌分解葡萄糖产酸，将培养液由原来的橘黄色变为红色，此为M．R．正反应。
３．吲哚实验原理：
某些细菌能够分解培养基内蛋白胨中的色氨酸，产主吲哚，吲哚与对二***氨基苯甲醛结合。形成玫瑰吲哚，为红色化合物，其反应如下：
４．***盐还原实验原理：
某些细菌能将培养基中的***盐还原为亚***盐、氨和氮气等。如果细菌能把培养基中的***盐还原为亚***盐，当培养基中加入格利斯亚***试剂时，则培养液呈粉红色或红色，为正反应。
如果在培养液中加入格利斯亚***试剂后溶液不出现红色，则有两种可能性：
1）细菌不能还原***盐，故培养后的培养液中仍有***盐存在，此为负反应。
2）***盐被细菌还原为亚***盐后，亚***盐继续被还原成氨和氮气，故培养液中也没有***盐存在，此反应为正反应。
培养液中***盐存在与否可用下列方法检查：在培养液中加入锌粉（使***盐还原为亚***盐）再加入格利斯亚***试剂，如溶液呈红色，则说明原来的***盐未被还原，此系负反应。但如果在培养液中加入锌粉及格利斯亚***试剂，溶液不呈现红色，则说明培养液中己不存在***盐，故为正反应。
５．柠檬酸盐实验原理：
肠杆菌科各属细菌利用柠檬酸的能力不同，有的菌可利用柠檬酸钠作为碳源，有的则不能。某些菌分解柠檬酸形成CO2、由于培养基中钠离子的存在而形成碳酸钠，使培养基碱性增加，根据培养基中的指示剂变色情况来判断试验结果。指示剂可用1％的溴麝香草酚蓝酒精溶液，（黄）～7．6（蓝）．
６．明胶水解实验：
某些细菌能分泌明胶酶分解明胶，产生小分子物质。如果细菌具有分解明胶的能力，则平板培养基中的明胶被分解成小分子的物质，在平板上加上蛋白凝固剂后，明胶被分解部分的培养基呈现透明的状态，可以使菌落周围出现透明圈。
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