文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
中国日本血吸虫线粒体DNA的遗传变异研究
姓名:郭凯文
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:牛安欧
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中国日本血吸虫线粒体的遗传变异研究
研究生郭凯文
导师牛安欧
华中科技大学同济医学院病原生物学系
中文摘要
本血吸虫病是一”严重”害人”健康、影响经济”设和社“”展
的人兽共患寄生虫病。在我国,日本血吸虫流行地区分布在长江流域及
其以南的省、市、自治区。由于各地区存在较大的生态环境差异和
自然环境的长期阻隔等因素,在长期进化过程中,我国日本血吸虫存在
不同程度的遗传分化。揭示自然隔离群之间日本血吸虫的遗传变异,对
血吸虫致病力、临床表现、对药物的反应和治疗效果的差异,传播动力
学、寄生虫与宿主的相容性等方面的研究有极大的帮助,并为指导抗血
吸虫药物的选择、血吸虫病的诊断、疫苗的研制以及进一步完善血吸虫
控制策略等提供科学的理论依据介研究采用聚合酶链反应一单链
构象多态性分析方法对我国不同自然隔离区日本血吸虫的
线粒体中细胞色素氧化酶亚基和脱氢酶亚基
基因片段进行研究,并运用生物信息学方法对其序列进行分析、
整理,得出序列系统进化树,从而获得中国日本血吸虫线粒体的
多态性差异资料。
方法
集中国台湾、云南洱源、四川天全、安徽贵池、湖南岳阳、江西
新建以及湖北武汉、湖北钟祥、湖北阳新、湖北监利、湖北松滋共七省
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十一地日本血吸虫标本。首先常规抽提基因组总其中包括线粒
体,接着以特异性引物对其线粒体进行扩增,再用
产物进行分析,其结果可直接用于血吸虫各地域株线粒体
遗传变异的分析。为了验证的结果及进一步分析日本
血吸虫线粒体的遗传变异、初步探讨线粒体进化过程,本
研究将扩增产物分别测序,以生物信息学方法对所测序列加以比
较,构建序列进化树。
结果
结果
①工产物经琼脂糖电泳后,在紫外线照射下可见所有样本
均显示一个条带,位于之间,片段无大小差异
②产物经琼脂糖电泳后,在紫外线照射下可见所有样本
均显示一个条带,位于之间,片段无大小差异。
结果
①工湖北省武汉、钟祥、阳新、松滋四地之间无差异,具相同
条带监利株具三个条带中国台湾两个条带湖南五个条带安徽三
个条带四川、云南有相近带型,在片段中有三个条带江西株有
四个条带。
②工湖北境内五个地域株中武汉株与监利株存在三个条带中
国台湾株日本血吸虫有两个条带湖南、安徽均有五个条带四川、云
南株分别存在三和四个条带江西地域株有四个条带。
序列分析结果
①中国日本血吸虫各地域株遗传距离为,明显小于与
曼氏血吸虫之间的遗传距离。
②中国大陆株与中国台湾株日本血吸虫之间遗传距离为
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。,存在较大差异,在树状图中可归为两类
③中国大陆山区型日本血吸虫,即云南洱源和四川天全之间遗传距离
为,在树状图中归为一类
④中国大陆湖沼洲滩型日本血吸虫株,即湖南岳阳、江西新建和安徽
贵池三个地域株之间遗传距离为,在树状图中处于并列
位置
⑤湖北省境内不同地域株之间遗传距离为,在树状图
中归为一类
⑥氨基酸模拟翻译结果各地域株之间氨基酸变异比例为,小
于序列变异程度
结论
本课题采用一序列测定研究方法对中国各地域株日本血吸
虫的遗传变异和进化情况进行研究。结果显示我国各地日本血吸虫存在
不同程度的遗传变异研究同时还发现我国各地域品系间亲缘关系密切,
存在共同的起源在标本的选择上,打破了传统上以省为界的壁垒,发
现湖北省境内不同地理位置的日本血吸虫之间还存在着一定的分化差
异通过对线粒体基因的研究发现,中国日本血吸虫不同种群间与
序列变异程度不一致,内部比内部存在更多的核昔酸变异
经比对模拟蛋白质一级结构序列之间和序列之间的变异程度提示,
线粒体基因中存在中性突变。最后,本课题还验证了技术能
够准确地揭示物种基因组的多态性,是研究生物遗传变异的有力工
具。
关键词日本血吸虫了线粒体地域品系遗传
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兀丫同源性比较序列分析
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前言
血吸虫病是一种严重危害人体健康、影响经济建设和社会发展的人
兽共患寄生虫病。提供的资料表明,全世