文档介绍：一、实验方法 1L- 甲状腺素致大鼠心肌肥厚模型取50只 220-250gSD 雄性大鼠,随机分为 6组,每组 10只。分别为:空白组、模型组、玄参高剂量组、玄参中剂量组、玄参低剂量组、卡托普利(阳性对照药) 。制备大鼠心肌肥厚模型。除正常组外,各组连续 7d 腹腔注射 L- 甲状腺素 ·kg -1·d -1, 1次/ 天,制成心肌肥厚模型;正常组腹腔注射等量注射生理盐水。各给药组在给予 L- 甲状腺素后以玄参高、中、低液灌胃给药;正常组、模型组给予等量生理盐水灌胃。连续给药 9天,于处理前禁食不禁水 12h ,取血和心肌进行各项分析。 2 大鼠心肌质量指数的测定大鼠心肌肥厚指数的测定: 取大鼠称体重(BW) 后腹主动脉取血。快速打开胸腔取心脏,去除心房组织,分离左、右心室,生理盐水漂洗去血,用滤纸吸干表面水分,电子天平准确称取左心室重量和全心重量。计算左心室重量/ 体重(LVW/BW) 、全心重量/ 体重(HW/BW) ,分别记为左心室肥厚指数(LVWI) 、全心肥厚指数(HWI) 。 3 心肌组织 Ang Ⅱ含量的测定组织匀浆制备: 各组大鼠取血后, 取左心室心肌组织约 300 mg /份,在4℃的生理盐水中漂洗 2次,除去血液,滤汁拭干。用分析天平称重,迅速置于冰浴中的微型手动匀浆器中,加入重量为组织重量9倍的4℃生理盐水,碾磨约10 min 制成匀浆,以 3000r / min 离心 15min ,取上清液置-70℃冰箱保存,待测。取上清液 200ul 加生理盐水 800ul 制备成 2% 的心肌组织匀浆。按血管紧张素Ⅱ试剂盒说明书及考马斯亮蓝蛋白测试盒说明书进行操作,测定 Ang Ⅱ及蛋白浓度,结果以每毫克蛋白中的 Ang Ⅱ含量表示。 4 心肌组织 SOD 、 MDA 活性测定去上清液,配置成一定浓度的组织匀浆,严格按照试剂盒说明书,用分光光度法检测心肌超氧化物歧化酶(SOD) 、丙二醛(MDA) 含量。同时进行蛋白测定, 按考马斯亮蓝蛋白测试盒说明书操作。结果以每毫克蛋白中的 SOD 活性表示。 5 心房利钠肽 ANP 的含量测定血清 ANP 含量测定:用 ELESA 法测定,常规方法取血并分离血清,严格按照试剂盒说明操作。二、造模方法的依据甲状腺素可以素激活了循环和组织中的 RAS ,使血管紧张素Ⅱ的含量增加; 增加肾上腺素能受体的表达; L-Thy 诱导的心肌重构具有缺血缺氧性损伤的特点,心肌线粒体中 SOD 活性降低, MDA 含量升高。(1) 甲状腺素激活了循环和组织中的 RAS , 在体内和离体实验中均发现甲状腺素直接刺激了肾素 mRNA ,加速了血管紧张素原的合成和分泌,血管紧张素(A ngⅡ) 生成增加,同时 Ang Ⅱ受体数目上调。 Ang Ⅱ是肾素血管紧张素系统的主要效应激素, 对心室重构起着核心的作用,局部的 Ang Ⅱ水平对重构起了决定性的作用, A ngⅡ能增加细胞 DNA 和 RN A 的含量及代谢转换, 增加细胞内蛋白质合成, 可使心肌细胞增生、肥大, 促进心脏重构肥厚。它的促肥厚作用起始于它和特异受体(如 AT 1 受体) 的结合, 再经受体后的信号转导通路而完成。(2) 增加肾上腺素能受体的表达, 甲状腺素对儿茶酚***等激素的作用能产生重要影响, 当循环中存在大量甲状腺素时,可增加肾上腺素能受