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课题2 月季的花药培养 (3).ppt

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文档介绍:专题3 课题2 月季的花药培养
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花丝
花药:囊状结构,内有很多花粉
(一)被子植物的花粉发育
1.雄蕊
一、基础知识
2.花粉:
3.花粉发育阶段:
由花粉母细胞(小孢子母细胞)历经减数分裂而形成,是单倍体的生殖细胞。
小孢子四分体时期、单核期、双核期。
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小孢子
母细胞
4个
小孢子
1个小孢子
(单核居中期)
花粉管
细胞核
生殖
细胞核
营养
细胞
生殖
细胞
精子
精子
减数分裂

有丝分裂

有丝分裂

特点:细胞质浓厚

4.被子植物花粉的发育过程
小孢子四分体时期
单核期
双核期
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(二)产生花粉植株的两种途径


移栽
花药中的花粉
胚状体
脱分化

愈伤组织
花药中的花粉
脱分化

分化
丛芽

再分化
丛芽



诱导
生根

体细胞胚(胚状体):
在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。
两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
特别提醒:
直接由器官产生;
来源:
由单个细胞产生;
由愈伤组织产生。
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愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
愈伤组织发育途径
部分花药产生愈伤组织
接种在平板上的水稻花药
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烟草花药培养
胚状体发育途径
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(三)影响花药培养的因素
1.材料的选择

花期:
初花期
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。
花粉:
单核期
单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。
花蕾:
完全未开放
挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花都不易选做实验材料。
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(三)影响花药培养的因素
花期早期;单核居中期与靠边期之间



培养基的组成



材料的选择



亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等



适宜的培养条件等
思考:为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?
花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。
2.其他影响因素

主要影响因素
生长旺盛植株花药较易形成花粉植株;栽培条件的好坏也影响花粉植株的诱导率。
25℃左右,花粉培养的早期,黑暗或弱光有利于花粉分裂的启动。
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【典型例题】
如图是花药培养产生花粉植株的两种途径,下列相判断错误的是(  )
A.图中的a是愈伤组织
B.①和②过程的实质相同
C.选择的花药在花粉发育过程中越早越好
D.整个培养过程中的细胞增殖方式只有有丝分裂
C
选择的花药太早或太晚都不利于培养,处于单核期的最好,尤其是单核靠边期。
【方法点拨】
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二、实验操作
(一)材料的选取
醋酸洋红法、焙花青-铬矾法
方法:
(1)醋酸洋红法(最常用方法)
①醋酸洋红的配置
将体积分数45%的醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,在加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。
②染色操作
将花药放在载玻片上,加一滴质量分数1%的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。
(2)焙花青-铬矾法
①卡诺氏固定

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