文档介绍：专题3 课题2 月季的花药培养
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花丝
花药：囊状结构，内有很多花粉
（一）被子植物的花粉发育
一、基础知识
:
：
由花粉母细胞（小孢子母细胞）历经减数分裂而形成，是单倍体的生殖细胞。
小孢子四分体时期、单核期、双核期。
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小孢子
母细胞
4个
小孢子
1个小孢子
（单核居中期）
花粉管
细胞核
生殖
细胞核
营养
细胞
生殖
细胞
精子
精子
减数分裂
有丝分裂
有丝分裂
特点：细胞质浓厚
小孢子四分体时期
单核期
双核期
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（二）产生花粉植株的两种途径
①
②
移栽
花药中的花粉
胚状体
脱分化
愈伤组织
花药中的花粉
脱分化
分化
丛芽
再分化
丛芽
诱导
生根
体细胞胚（胚状体）：
在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
特别提醒：
直接由器官产生；
来源：
由单个细胞产生；
由愈伤组织产生。
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愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
愈伤组织发育途径
部分花药产生愈伤组织
接种在平板上的水稻花药
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烟草花药培养
胚状体发育途径
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（三）影响花药培养的因素
花期：
初花期
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。
花粉：
单核期
单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
花蕾：
完全未开放
挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花都不易选做实验材料。
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（三）影响花药培养的因素
花期早期；单核居中期与靠边期之间
培养基的组成
材料的选择
亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等
适宜的培养条件等
思考：为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
主要影响因素
生长旺盛植株花药较易形成花粉植株；栽培条件的好坏也影响花粉植株的诱导率。
25℃左右，花粉培养的早期，黑暗或弱光有利于花粉分裂的启动。
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【典型例题】
如图是花药培养产生花粉植株的两种途径，下列相判断错误的是( )
B.①和②过程的实质相同
C
选择的花药太早或太晚都不利于培养，处于单核期的最好，尤其是单核靠边期。
【方法点拨】
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二、实验操作
（一）材料的选取
醋酸洋红法、焙花青-铬矾法
方法：
（1）醋酸洋红法（最常用方法）
①醋酸洋红的配置
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。
②染色操作
将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。
（2）焙花青-铬矾法
①卡诺氏固定