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常用试剂的配制.doc

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常用试剂的配制.doc

文档介绍

文档介绍:Revised by Petrel at 2021
常用试剂的配制
常用溶液的配制
信息来源:生物谷 更新时间:2004-12-211:33:00
一、常规溶液
(一)1/15mol/LPBS(磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution,PBS)
甲液:1/15mol/LNa2HPO4溶液

蒸馏水?加至1000ml
乙液:l/15mol/LKH2PO4溶液

蒸馏水?加至1000m1
分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:
pH
甲液ml
乙液mI
pH
甲液ml
乙液mI




































(二)%台盼兰染液
称取台盼兰(Trypanblue),溶于100ml生理盐水中,加热使之完全溶解,用滤纸过滤除渣,装入瓶内室温保存。
(三)%酚红指示剂

(%)NaOH?15ml
双蒸水85ml
,,并不断吸出已溶解的酚红液,直至全部溶解,然后加入85ml双蒸水,颜色为深红,经粗滤纸过滤后使用,室温保存。
(四)%NaHCO3溶液
,溶于100ml蒸馏水中,室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌,4℃冰箱保存)
(五)10μg/ml秋水仙素
秋水仙素lOmg
生理盐水?100ml
装入茶色瓶中,为贮备液,4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
(六)%KCl-%柠檬酸钠低渗液
%%柠檬酸钠两液等量混合即可,室温保存。
(七)2%柠檬酸钠
称取柠檬酸钠2克,加100ml双蒸水即可,室温保存。
(八)%次***兰染液
称次***兰(Methyleneblue),加蒸馏水100ml,室温保存。
(九)%醋酸洋红(AceioCarmine)染液
洋红lg
醋酸90ml
蒸馏水110ml
将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸,然后将火焰移去,立即加入1克洋红,使之迅速冷却过滤,加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴,直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好,室温保存。
(十)1%甲苯***兰(Toluidineblue)
称取甲苯***兰1克,加蒸馏水lOOml。
(十一)1/3000中性红染液
取中性红(Neutralred),加蒸馏水300ml。室温保存。
(十二)Giemsa染液
1.贮备液
Giemsa粉?1g
纯甘油66ml
甲醇66ml
先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油,充分研磨,呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入,放入56℃温箱中2小时,然后加入甲醇,保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。
2.工作液
:20混合。
(十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液

乙醇50ml
醋酸5ml
甘油50ml
硫酸铝钾5g
蒸馏水50ml
将苏木精溶于少量的乙醇中,再加醋酸并搅拌,以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器,同时加入其余的乙醇;硫酸铝钾需研磨并加热,然后溶解于蒸馏水中,将其一滴滴地加入上边的溶液,并不断摇动,此液配好后,将瓶口用纱布盖好,置通风处,经常摇动以加速其成熟,成熟约需4周左右,成熟的染液为深红色。
二、细胞化学和细胞组分分离溶液
(一)M一缓冲液
眯唑(Imidazole)

MgCl2·6H2O?



甘油297ml
蒸馏水加至1000ml

(二)2%TritonX一100溶液
量取2mlTritonX一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液,加M缓冲液98ml即可。
(三)%考马斯亮兰R-250染液