文档介绍：重庆医科大学
硕士学位论文
nm23-M2表达载体构建及其在小鼠胚胎着床和早期发育中的作用
研究
姓名:李茂萍
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:何俊琳
20050601
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符号说明英文缩写英文名称中文名称氨苄青霉素碱基对互补脱氧核糖核酸二氮基联苯胺二乙基焦碳酸盐脱氧核糖三磷酸二硫苏糖醇脱氧核糖核酸核苷二磷酸激酶溴化乙锭微量离心管苏木素一伊红辣根过氧化物酶含氨卞青霉素培养基吸光度过硫酸铵二维电泳取蒸水乙二胺四乙酸过氧化氢培养基信使核糖核酸千道尔顿小时猠重庆医科大学硕士研究生学位论文猟‘瓺瓻
、Ⅳ
泶镌靥骞菇ḿ捌湓谛∈笈咛プ糯埠驮缙诜育中的作用研究摘要宫内膜中的表达、分布规律及动态变化,探讨其作用机理,为探索人甊ɡ┰,经限制性内切酶酶切后克隆入原核两周,处死动物,收集血清,琼脂双向扩散法检测抗血清效价。当宫内膜组织以及、小鼠子宫内膜着床旁和着床点组织。本实验通过构建吮泶镏柿#泶锊⑻岽恐刈榈鞍祝础。并从基因和蛋白水平研究甅谛∈笈咛プ糯埠头⒂缙谧类胚胎着床和早期发育机制提供实验基础和理论依据。方法:表达载体校菇ㄔ吮泶镏柿2⒔忻盖泻虳双向测序鉴定。和层柝法纯化。纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,免疫全过程结束后免疫印迹鉴定,免疫组化比较它与抗籋固逶诩觳馕丛行∈物模型,、、橛址治W糯才院妥糯驳阕以、制各其抗体,,和免疫印迹鉴定,亲抗体效价达到保λ劳茫占G濉?寡G寰缀筒阄龃炕子宫内膜甅鞍妆泶锏牧槊粜浴⑿∈笕焉,,天訢表示亩和、表示7直鹑∥慈焉镒楹虳樾∈笞目的:重庆医科大学顼士研究生学位论文
也可见。腺上皮细胞、腔上皮细胞和基质细胞胞浆内均可见棕黄色蝗焉锸奔渥糯驳惚免疫组织化学结果表明:未妊娠与妊娠小鼠子宫内膜都有籑明显高于着床旁..F浞植继氐阄0秃停蚝私停颗粒沉着,上皮细胞染色强度大于基质。呈距离梯度分布,;免疫组织化学法检测甊┰銎未笮∮朐て谥相同,。法鉴定为的鞍祝康牡鞍缀空季遄艿鞍缀量的%以上,经纯化后得到纯度为%以上的一蛋白。该蛋白成功免疫新硬兰兔,琼脂双向扩散实验测得所获血清效价为QG宕炕蟮玫酱慷任ヒ訨ǘ任/的抗体,经免疫印迹鉴定为抗一抗体。免疫组化结果显示,抗固寮觳馕慈焉镄∈笞庸谀甅鞍妆泶锏牧槊甊峁砻鳎何慈焉镉肴焉镄∈笞庸谀ざ加衝基因的表达;,,:,呈递增趋势;同一妊娠时间着床点表达多呈区域性分布。腺上皮、腺腔呈高表达,以胞浆分布较多,胞核一蛋白的表达和分布情况。结果:.
关键词:一,基因克隆,基因表达,胚胎着床,发商的腺上皮细胞膜上,基质少量表达,开始在基质的蜕膜细胞表面其检测,蛋白表达的灵敏性惠于抗籋固濉内膜、母胎界面、细胞外基质、以及它们之间相互作用的立体网着床点的子宫内膜表达越高。未妊娠和天主要表达在子宫内膜开始出现高表达。结论:晒菇ㄖ刈橹柿/籑异性体液免疫,产生特异性抗体,提示重组甅鞍拙哂辛好的免疫原性和免疫反应性。所获血清纯化后得到高纯度的抗畁籑斡肓伺咛プ糯布霸缙诜⒂稍诓煌逼诜⒒硬煌生物学效应。在胚胎着床及早期发育的微生态系统磁咛ァ⒆庸络系统蟹⒒又匾5鹘谧饔谩晒Ρ泶锊⒋炕痳.