文档介绍:临床免疫学检查
1、免疫:是机体辨认和排斥抗原性异物一种生理功能
2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜有关淋巴组织
4、B细胞:通过辨认膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg
表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞mIg重要为mIgM和mIgD)同步检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测办法:溶血空斑形成实验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞标志是CD4;杀伤T细胞标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);
CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)
CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导细胞毒实验)
CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)
T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖实验有:形态法、核素法。
T细胞亚群分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法
*E花环实验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数一种实验;
6、NK细胞:具备细胞介导细胞毒作用。直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染细胞)
表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞涉及:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,涉及骨髓内前单核细胞、外周血中单核细胞和组织内巨噬细胞)和中性粒细胞。(表达MHCⅡ类分子)
8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
9、免疫球蛋白可分为分泌型(sIg,重要存在于体液中,具备抗体功能)及膜型(mIg,作为抗原受体表达于B细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白)
10、免疫球蛋白按含量多少排序:IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五类(按重链恒定区抗原性(CH)排序)
免疫球蛋白含量测定:单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。
11、免疫球蛋白同种型抗原决定簇位于恒定区(CH、CL)
12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL(高变区)是抗原结合部位。
13、IgG:血清中含量最高免疫球蛋白(IgG1最高),血液和细胞外液中重要抗体。也是再次免疫应答重要抗体,是唯一能通过胎盘抗体,大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是IgG,某些自身抗体及超敏Ⅱ型抗体是IgG,免疫学检测中第二抗体也以IgG为主。
14、IgA:分血清型(单体存在)及分泌型;分泌型IgA(sIgA)为二聚体,性能稳定,重要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中,局部浓度高,是参加黏膜局部免疫重要抗体。
15、IgM:为五聚体,重要存在于血液中,是Ig中分子量最大(又称巨球蛋白)。个体发育最早合成和分泌抗体。抗原刺激后体液免疫应答中最先产生抗体,感染过程中血清IgM水平升高,阐明近期感染。新生儿脐血中若IgM增高,提示有宫内感染。
16、IgE:为单体构造,正常人血清中含量最低。IgE为亲细胞抗体,介导Ⅰ型超敏反映。特异性过敏反映和寄生虫初期感染患者血清中可升高。
17、补体:具备酶样活性球蛋白(肝细胞、巨噬细胞产生);激活途径重要有三种:典型途径(以结合抗原后IgG或IgM类抗体为重要激活剂(双链DNA),C1~C9所有参加)、代替途径(病原微生物细胞壁成分(脂多糖)直接激活补体C3,然后完毕C5~C9激活过程)、MBL途径(由急性炎症期产生甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动激活)。
18、补体系统中C3含量最多,C2含量至少。
19、灭活:加热56℃30分钟,补体丧失活性
20、补体清除免疫复合物方式:吞噬调理;免疫粘附;免疫复合物抑制。
21、完全抗原=反映原性+免疫原性。半抗原=反映原性(无免疫原性)
22、抗原抗体结合力(分子间引力):静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力(最强)
23、抗原抗体反映四大特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性;受反映条件(如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等)影响。
24、抗体过量——前带;抗原过量——后带(钩状效应)
25、抗原抗体反映可分为两个阶段:第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合阶段,此阶段反映快,仅需几秒至几分钟,但不浮现可见反映;第二阶段为可见反映阶段,此阶段反映慢,往往需要数分钟至数小时。