文档介绍：临床基因扩增（PCR）实验室设计探讨
1概述 临床基因扩增实验又称PCR实验,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等 病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出 一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难 以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生 广为认可,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是,这种实验 需要有能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩 增检验实..…
1概述
临床基因扩增实验又称PCR实验，是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感 染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病 毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难以检测 出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认 可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是，这种实验需要有 能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验 实验室的建设越来越得到重视，因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要 的作用。本文主要从临床基因扩增检验实验室的平面布局，空调通风系统设计、气流控制和 污染的防制几个方面对
实验室设计中的主要特点进行了阐述。
临床基因扩增检验实验室设计的核心问题是如何避免污染。因此，实验室的平面布局、空 调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。下面就对这几个方面分别进说 明。
2 PCR实验室平面布局
临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备 区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域 必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区一标本制备区一扩增反应混合物配 制和扩增区一扩增产物分析区。
各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。
PCR实验室平面布置示意图如图1所示。
图1 PCR实验室平面布置示意图
3实验室空调通风系统设计及压力控制
PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜 采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要 求。
该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和 用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内， 并在本区内制备成所需的贮存试剂。
对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。
该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增 反应管和测定RNA时cDNA的合成。
本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。 另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。
该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cD