文档介绍：免疫学检测技术中卫市第一人民医院魏玉红一、免疫学检验原理?抗原-抗体反应:指抗原与相应抗体在体内、外发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体存在于血清中,故又称血清学反应( serological reaction) ?应用: ?用已知抗原检测未知抗体; ?用已知抗体检测未知抗原: ?定性或定量检测体内各种分子; ?用已知抗体检测半抗原物质。 ?特异性:一种抗原通常仅能与由它刺激所产生的抗体结合。?分子基础: 抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。(一)抗原-抗体反应的特点?交叉反应( cross reaction )性:若两种抗原分子有一个或数个相同(或相似)的决定基, 则针对一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应。?结合价: 天然抗原分子表面一般含多种抗原决定基,可与多个抗体分子结合,为多价。单体形式的抗体分子有两个 Fab 段,能结合两个相同的抗原决定基, 为两价。?比例合适: 若抗原、抗体的数量比例合适,抗体分子的两个 Fab 段分别与两个抗原决定基结合,相互交叉连接成网格状复合体,则反应体系中基本不存在游离的抗原或抗体,此时形成肉眼可见的反应物(沉淀物或凝集物)。因此,确定反应体系中抗原、抗体的最适比例十分重要。?前带现象( prozone )和后带现象( postzone ) ? Ab 过剩和 Ag 过剩 抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象, 抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象, 与两者的浓度和比例密切相关与两者的浓度和比例密切相关前带现象( prozone )和后带现象(postzone ) Ab过剩和 Ag过剩 网格学说( lattice theory ) 抗体过剩抗原过剩抗体抗体比例合适抗原抗体抗原- 抗体反应为分子表面的非共价结合,结合虽稳定但可逆。在一定条件下(如低 pH、高浓度盐、冻融等),抗原- 抗体复合物可被解离。解离后的抗原和抗体仍保持原有理化特性和生物学活性。根据此特点,可借助亲和层析法纯化抗原或抗体。 : 反应快,不可见。反应快,不可见。可见的反应阶段: 反应慢,出现凝集、沉淀和反应慢,出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象。细胞溶解等现象。