1 / 29
文档名称:

宏基因组文库构建.ppt

格式:ppt   页数:29页
下载后只包含 1 个 PPT 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

宏基因组文库构建.ppt

上传人:2786321826 2016/6/9 文件大小:0 KB

下载得到文件列表

宏基因组文库构建.ppt

相关文档

文档介绍

文档介绍:宏基因组文库构建威斯腾生物技术中心 400-675-6758 什么是文库? ? Library ?基因文库(也称 DNA 文库)是指某一生物体全部或部分基因的集合, 就像一个没有目录的“基因图书馆”?基因文库的组成: 外源 DNA 片段:研究对象基因组 DNA 或 cDNA 载体:质粒载体( plasmid )、黏粒载体( cosmid )、人工染色体( BAC 、 YAC )等宿主:大肠杆菌( )、酵母( haromyces cerevisiae ) 1976 年 , 提出了一个完全的基因文库所需克隆的计算公式 n=ln(1-p)/ln(1-f) n: 一个完全基因文库所应包含的重组体克隆数 p: 所期望的目的基因在基因文库中出现的几率 f: 插入片段的平均大小与基因组 DNA 大小的比值哺乳动物 3 × 10 9kb 若 p=99% 平均克隆片段 20kb f=20kb/3 × 10 9 n= 4639221bp p=99% f=20kb/4600kb n= p=99% f=10kb/4600kb n=2116 若这些大量的重组 DNA 分子所含的外源 DNA 不是基因组 DNA ,而是由某一生物的特定器官或特定发育时期细胞内的 mRNA 经反转录形成的 cDNA ,它们所构成的重组 DNA 克隆群体,则称之为 cDNA 基因文库 cDNA 文库:可装载的外源 DNA Plasmid <10kb λ Phage 0-23kb Cosmid ~45kb BAC ~ 100kb YAC ~ 300kb- 载体的选择: 粘粒克隆所需的克隆子数是λ phage 的一半, 如λ需 700000 时, cosmid 需 350000 个如无特殊需要(如单个λ phage 不能包容靶基因片段或要分离一系列跨过染色体 DNA 特大区段的重叠克隆时)一般不采用 cosmid ,因其在构建文库和贮存文库比λ phage 困难得多 YAC 可用于克隆 500kb 以上,甚至几 Mb 的 DNA 片段 BAC 可减少 DNA 分子间的重组基因克隆的策略基因克隆的本质从文库中筛选目标克隆,重点在“筛选”常见筛选工具: 探针狭义: 核酸, 抗体广义: 还包括其他筛选手段?抗性基因: antibiotics 抗性基因, 抗重金属活性一、功能筛选?分解基因: 苯环化合物, 分解酶?功能活性:杀虫,酶?启动子/复制子利用目标基因的特定功能进行筛选

最近更新

面粉水溶物黏度与流变学特性的关系研究 3页

隧道纵向地震反应最不利时刻的确定及其应用 3页

锚网支护在高应力破碎岩体巷道中的应用研究 3页

钢铁联合企业氮氧化物排放研究 3页

金华古子城历史文化街区旅游业态调查研究 3页

诗歌意象赏析课件 34页

近红外响应的Ⅲ-V族半导体光电阴极材料及工艺.. 4页

过渡金属磷化物制备及催化加氢脱氯研究进展 4页

载机姿态变化对目标检测性能的影响分析 3页

车辆液压减振器阀系异响成因分析 3页

超级电容公交车充电对电网电能质量的影响分析.. 3页

资产负债表视角下的公允价值会计顺周期效应研.. 3页

试论中国农村经济发展面临的挑战和对策 3页

解析变齿厚蜗杆的数控车加工技术 3页

装配式建筑中异形单元幕墙设计探讨 3页

葡南三断块特高含水期油藏数值模拟精度提高方.. 4页

2025年度个人别墅水电系统升级改造合同 9页

航管雷达一二次融合异常情况分析 3页

胶原抗冻肽的制备及在冷冻面团中的应用 3页

职业学校经济管理类专业实验教学体系构建研究.. 3页

蛋白质工程的崛起 21页

纯方位法测量物体入水点位置研究 3页

粗大鲵油的精制及其脂肪酸组成分析 3页

等值理论在商务英语翻译中的应用 3页

稠油化学降黏技术在稠油井的应用 4页

营养素供给量标准 36页

福建数字地震台网与模拟地震台网地震参数比较.. 4页

碳基光催化纳米抗菌复合材料的抗菌机理及研究.. 3页

矿山采矿技术中的安全管理问题 3页

2024年辽宁省交通高等专科学校单招职业技能测.. 76页