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蛋白质的性质实验1PPT教案.pptx

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文档介绍

文档介绍:会计学
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蛋白质的性质实验1
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实验目的
1. 加深理解所学有关的蛋白质性质的理论知识
2. 掌握氨基酸和蛋白质常用的定性、定量分析的方法及原理
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实验原理
一、蛋白质呈色反应
二、蛋白质沉淀反应
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一、蛋白质呈色反应
蛋白质的呈色反应是指蛋白质所含的某些氨基酸及其特殊结构,在一定条件下可与某些试剂发生了生成有色物质的反应。不同蛋白质分子所含的氨基酸残基不完全相同,因此所发生的成色反应也不完全一样。
呈色反应并不是蛋白质的专一反应。因此,不能仅仅根据呈色反应的结果为阳性就来判断被测物质一定是蛋白质,至少要用2种以上的方法来鉴别。
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蛋白质呈色反应
(一)米伦氏反应
(二)双缩脲反应
(三)蛋白黄反应
(四)茚三***反应
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(一)米伦氏反应
蛋白质溶液中加入米伦试剂(亚******、******及***的混和液),蛋白质首先沉淀,加热则变为红色沉淀,此为酪氨酸的酚核所特有的反应,因此含有酪氨酸的蛋白质均呈米伦反应。
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(二)双缩脲反应
当尿素经加热至180℃左右时,两分子尿素脱去一分子氨,进而缩合成一分子双缩脲。其在碱性条件下双缩脲与铜离子结合成红紫色络合物,此反应称为双缩脲反应。
蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用呈现紫红色,此类似反应也称蛋白质的双缩脲反应。凡分子中含有两个以上肽键的化合物都呈此反应,故所有蛋白质都能与双缩脲试剂发生反应。
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反应过程如下:
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(三)蛋白黄反应
在蛋白质分子中,具有芳香环的氨基酸(如酪氨酸,色氨酸等)残基上的苯环经***作用可生成黄色的硝基化合物,在碱性条件下生成物可转变为桔黄色的硝醌衍生物; 此蛋白黄反应(以苯酚为例)为:
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(四)茚三***反应
在弱酸条件下(pH5-7),蛋白质或氨基酸与茚三***共热,可生成蓝紫色缩合物。此反应为一切蛋白质和α—氨基酸所共有(亚氨基酸如脯氨酸和羟脯氨酸产生黄色化合物),含有氨基的其他化合物亦可能发生此反应。