文档介绍：弁宛头舞
环境微生物综合性实验报告
官洲河段不同断面微生物群落分布的测定
见****类型专业见****br/>院别化学与环境学院
专业环境工程
指导教师成文老师
班级 2010级环境工程
姓名翟锦亮
学号 20102400132
2012年12月
目录
.前言
.实验方案与思路
.实验方法
仪器
试剂
内容
.实验结果
水样观察
水样细菌总数的计算
水样菌落的培养观察
水样菌落数的计算
微生物个体菌种形态的观察
.实验分析
实验结果分析
实验存在问题
实验改进意见
.实验结论
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.实验收获
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微生物的群落结构与功能是微生物生态学的研究主题之一。水体中微生物与区域环境有着密切的联系，其数量及种群分布与水的类型、有机物含量、微生物的拮抗作用等多种因素密切相关。对它的研究将有助于了解水体的富营养现状及水域中C N P循环方式，并可为水体的整体治理方案提供依据[2]0
本实验将大学城官洲河段到入珠江段分为三个断面（对照断面，控制断面，消减断面），在同一天同一时间段对各断面水体的水样分别采样比较，测定水体中微生物的种类和数量，了解官洲河段不同断面的水体中存在的微生物的种类和数量，分析各断面中微生物群落的分布特点，了解各断面水体污染情况以及污染物对水体中微生物群落的影响。
2、实验方案与思路
采样容器的洗涤和灭菌
水样的采集
水样微生物的观察
培养基的制备
微生物的纯种分离与培养
微生物菌种的革兰氏染色
微生物菌种的观察与鉴定

实验仪器
高压灭菌类：培养皿（12个）、试管（9支）、移液管（3支，1mD、高压蒸汽灭菌器、
锥形瓶（1个）
制备培养基类：烧杯（1000mL、药物天秤、玻璃棒、药匙、pH试纸、加热器、超净工作室、恒温培养箱
观察类：显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、血球计数板、滴管、
烧杯、
量筒（1个，10mD
实验试剂
肉膏陈淀粉培养基配方[1]:牛肉膏3g,蛋白陈10g,淀粉2g,***化钠5g,琼月旨 15-20g,蒸储水 1000mL pH：〜,。
灭菌条件：（121oC, 15〜20min）。
革兰氏染色液一套：草酸钱结晶染色液，革兰氏碘液，体积分数为 95%勺乙
醇，番红染液
其他：去离子水、无菌水
实验内容
①实验器材的洗涤与灭菌⑴
将培养皿、试管、移液管用洗衣粉洗刷并用自来水冲洗干净，再用去离子水冲洗1—2次，然后用报纸包好放入高压蒸汽灭菌器中灭菌（121°C,相对蒸汽压 , 15—20min）,灭菌后放入无菌室备用。
②水样的采集
按下图所示分别到三个采样点进行采样。采样时，应小心开启包装纸或瓶盖，避免瓶盖或瓶颈受到杂菌污染
同斶
鹳书、
水流方向
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③水样的保存
为防止微生物发生质的改变，装好的样品瓶要在绝热箱中运送。当外界温度较高时还要冷却，采样容器也不要受任何直接阳光照射，以免紫外线杀死微生物。采好的水样应立即送往实验室，一般从取样到检验不宜超过两小时，否则应使用10oC以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6小时，实验室接到送检样品后应将样品立即放入冰箱，并在两小时内进行检验，如果因路途遥远，送检时间超过6小时，应考虑采用延迟培养法［4］。
④水样微生物的观察与计数

(1)观察比较从三个断面(对照断面、控制断面、削减断面)取回来的水样，简单描述三个水样的外观特征。
(2)用压滴法分别制片观察三个断面的原水样水中微生物的种类、数量和形态。
*压滴法制片方法［1］:如下图所示，取一片干净的载玻片放在实验台上，用滴管吸取样品于载玻片中央，用干净的盖玻片覆盖在液滴上(注意不要有气泡)即成标本片，用低倍镜和高倍镜观察，要充分利用显微镜的移片夹的移动，注意观察微生物组成。

（1）血球计数板的细胞计数
）稀释：将样品稀释至合适的浓度，一般将样品稀释至每一中格约有15~20 个细胞数为宜。本实验为了方便操作，故直接使用用于水样细菌稀释培养的稀释水样观察。因此，水中微生物计数应该在水中微生物纯种分离之后，以防止污染
稀释水样。
）加被测水样至血球计数板：取已洗