文档介绍：四君子护康颗粒长期毒性试验四君子汤, 是人参、白术、茯苓、甘草四味基本中草药为主的古方剂, 主治脾胃气虚。该方为治疗脾胃气虚证的基础方, 後世众多补脾益气方剂多从此方衍化而来。临床应用以面白食少,气短乏力,舌淡苔白, 脉虚弱为辨证要点。四君子汤是从《伤寒论》中的“理中丸”脱胎, 把原方中秉性燥烈的干姜去掉, 换成了性质平和的茯苓, 由驱除大寒变成温补中气。方中只人参、白术、茯苓、甘草四味, 不热不燥, 适度施力, 从了“君子致中和”的古意。利用现代制药工艺技术, 将本方改型为颗粒剂, 克服了汤剂的缺陷[1]。但是它的现代药理学长期毒性实验研究却未见报导。 1 实验材料 药物四君子护康颗粒制剂,由安徽中医学院药学院中药药理实验室及安徽中医学院中药实验室提供。 动物 Wistar 大鼠 80 只,体重 120 ~ 200 g,6~8 周龄,雌雄各半, 由内蒙古大学实验动物研究中心提供, 清洁级, 饲料也为该中心销售的固体饲料, 自由饮水。饲养条件: 安静、清洁、通风、室温 22±2℃、湿度: 60± 10% 。 主要试剂及仪器电子秤、灌胃器、 10 ml 注射器、乙醚、抗凝管、干燥管、血管夹、组织剪、 ABOTT1700 全自动血细胞分析仪、 HITACH7060 全自动生化分析仪、 10% 福尔马林溶液、石蜡、 OLYMPUS H32103 型光学显微镜( JAPAN 706093 ) ,切片机(浙江金华益迪无线电厂) ,精细天平( FA1104 上海天平仪器厂)。 2 方法[2-3] 动物分组将动物随机均匀分为大、中、小剂量组和对照组, 每组 20 只,雌雄各半,每笼 5 只饲养。 给药剂量剂量设置依据参考人临床用量与大鼠间进行换算。①大剂量组: (50 倍量);②中剂量组: (16 倍量);③小剂量组: (5 倍量);④对照组:不给药。 给药容量、途径及时间用药组按剂量将药物以 5ml 水配制成溶液,于每天上午 8~ 10 时,灌胃给药,连续给药 90 天。 观察指标①一般状况观察每天观察体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、摄食量, 每周称体重 1次。②血液学指标观察用药 45 天后, 每组尾尖采血,用 ABOTT1700 全自动血细胞分析仪检查血常规( 红细胞、血红蛋白含量、白细胞计数、淋巴细胞绝对值、血小板、红细胞压积、红细胞分布宽度、平均红细胞体积等); 用药 90天后, 乙醚麻醉动物, 心脏取血, 送检验科行血液学指标和血液生化学指标检查,处死动物,再进行尸解。③血液生化学指标谷草转氨酶( GOT ), 谷丙转氨酶( GPT ), 碱性磷酸酶( ALP ), 尿素氮( UK ), 肌酐( CR ) ,总蛋白( TP ) ,白蛋白( ALB ) ,血糖( GLU ) ,总胆红素( T-BILI ), 总胆固醇( CHO ), 凝血时间( CT )。④系统尸解及计算脏器系数对所有动物进行尸解, 取脏器。对脏器进行称重, 并计算脏器系数( 脏器系数= 脏器湿重/ 动物体重× 100) 。⑤病理组织学检查对所有动物进行病理组织学检查, 所检查的脏器和组织为:心、肝、脾、肺、肾、胃、睾丸、卵巢、胸腺。经 10% 中性福尔马林固定, 取材作常规石蜡