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家兔dic实验报告.pdf

文档介绍

文档介绍:家兔 dic 实验报告
篇一:功能学实验家兔弥散性血管
内凝血
功能学实验家兔实验性弥散性血管
内凝血实验报告
一.实验目的
应用静脉注射兔脑浸液方法,复制
家兔实验性 DIC 。通过实验和几项血液
学指标的测定及结果分析,了解实验室
诊断 DIC 的常用方法。 并且联系理论知
识加深理解 DIC 的病因及发病机理。
二.实验动物
未知性别家兔(实验室提供)一只。
三.实验过程
1. 家兔于仰卧位固定,颈部剪毛,
在颈部皮下注射局麻药 1%普鲁卡因约
5ml,行局部麻醉。
2. 用剪刀颈部切开皮肤, 钝性分离
皮下组织,暴露气管后往外侧拉开切口
边缘的皮肤及下方的肌肉组织,找到颈
动脉并用玻璃分针分离, 行颈动脉插管。
3. 第一次采集血标本: 预先向 10ml
离心管中注入%枸橼酸钠溶液。再打开
血管夹,从颈动脉插管放血 ,立即反复
颠倒混匀(切忌振荡混匀),待离心。
向动脉插管中回推生理盐水,夹好血管
夹。
4. 复制 DIC 模型:抽取 2 %兔脑
浸出液 10ml 于注射器中, 经耳缘静脉缓
慢推注,注入速度为每分钟 2ml 以下。
同时密切观察家兔反应,如出现呼吸急
促,烦动不安,当即停止注射,迅速进
行第二次采血。 若注射完后家兔未挣扎,
则在注射后计时 2min,2min 后进行第二
次采血。采血方式与第一次采血相同。
5. 将前后两次所得的抗凝血,经
3000rpm离心 5min,将上层血浆清液分
别吸至两支清洁试管中,切忌吸入细胞
成分,并作好标记备用。其中一支试管
吸入血浆,另一只试管尽量吸取剩下的
血浆。
6. 血浆鱼精蛋白副凝固试验( 3P
实验):向吸取血浆的两支试管中加入
1%鱼精蛋白溶液 50μl ,轻轻摇匀后, 在
37℃水浴 15min。取出试管, 在灯光下对
黑色背景一边晃动试管一边观察,溶液
清澈者为阴性,出现絮状沉淀或胶冻状
物为阳性。
7. KPTT, PT, TT, FIB 实验:剩余
两支试管使用凝血仪测定 KPTT, PT, TT
和 FIB,并记录数据。
四.实验药物及器材
实验药物: 2%兔脑浸出液(临用前
配,并在 37℃保存), 1%普鲁卡因溶
液,%枸橼酸钠溶液。生理盐水, 1%鱼
精蛋白溶液。
实验器材:兔手术台,手术器械,
37℃电热恒温水浴箱,离心机,刻度离
心管( 2 支),试管( 5 支),移液器
(100μl ,1000μl ),纱布。
五.实验结果
1、实验现象记录
家兔皮下注射局麻药后,在皮下形
成鼓包,经按摩揉动数分钟后,鼓包仍
存在,局麻药未完全吸收。经家兔耳缘
静脉缓慢推注兔脑浸出液后,家兔表现
较平静。推注完成后计时 2min27s 时家
兔出现呼吸急促,燥动不安,欲挣脱动
作,此时进行第二次采血,并离心,进
行各项指标测定。 家兔在第二次采血后,
又重新恢复平静,呼吸正常。一小时后
家兔仍未死亡。
六.讨论
1. 静脉注射兔脑浸液引起 DIC 的原
因和机制
兔脑浸液属于组织因子,大量的兔
脑浸液静脉注射后,可激活家兔的外源
性凝血系统,启动凝血过程,依次激活
凝血因子 FIX, FVIII, FX 等,激活凝血
酶,从而使血小板聚集和纤维蛋白原变
为纤维蛋白,促进凝血。另外,凝血酶
激活后反馈性激活 FIX, FX, FXI, FXII
等,扩大凝血反应。此即为高凝期,微
循环易形成广泛的微血栓。
大量凝血酶的激活和微血栓形成,
使血液中凝血因子和血小板被大量消
耗,同时可能继发性激活纤溶系统,导
致凝血系统与纤溶系统不平衡,血液处
于消耗性低凝期,此时机体有明显出血
症状。
DIC 时产生的大量凝血酶和 FXIIa
等激活纤溶系统,产生大量纤溶酶,导
致纤溶亢进,大量纤维蛋白降解产物形
成,具有明显的抗凝作用,称继发性纤
溶亢进,此时机体出血十分明显。