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实验室菌种管理规程.docx

上传人:百里登峰 2021/6/25 文件大小:16 KB

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实验室菌种管理规程.docx

文档介绍

文档介绍:升品协谊
实验室菌种管理规程
目的:保证菌种合理、有效地使用和保存,最大限度降低变异率,确保菌 种的溯源性与稳定性,保证实验室和社会的生物安全。
职责:主管负责菌种的出入库保管、保存、分发,组员负责菌种的确认、 传代、使用及销毁。
范围:本规程适用于实验室菌种的管理,包括菌种的保存、传代、使用及 销毁等。
1菌种的保存

工作用菌种采用平板低温保存法。将菌种接种在适宜的固体培养基上,
待菌生长充分以后,转移至 2~8C冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的 短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应 灭活处理后销毁。保存时间为 1周,超过该期限前挑取单菌落重新于琼脂 平板划线活化,若菌落活力下降则从-80 C冰箱中取用甘油冷冻管。

采用甘油冷冻管保藏法。

用无菌接种环轻轻刮平板上的单菌落并接种至适宜的液体培养内,置 于适宜的培养条件下培养,菌液充分振荡后取适宜体积加入到已灭菌的冷
冻管内,再加入等体积的无菌甘油(浓度 40%),即为20%甘油菌悬液,轻
升品协谊 轻振摇,使内容物充分混合,在-80C冷冻条件下保存,保存期限为 3年。 每个菌株保存至少30个无菌冷冻管。使用时,取出一支放至室温,接种增 菌培养或接种至琼脂平板复苏,挑取纯菌落传代或工作用。
2菌种的传代

当工作用菌种代数小于5时,在规定保存期限内,可直接用上一代工 作用菌种转接下一代工作用菌种。取在冰箱 2〜8 C保存的工作用菌种用普 通琼脂平板传代,并将新传代的培养物替代原有的菌种,作为工作用菌种。 也可取用 甘油冷冻管保藏法”保存的菌种,进行复苏,直接作为工作用菌种。 菌种每1周传代一次,当超过5代,须用甘油冷冻管保藏法”保存的原始菌 种传代。

首先划线接种确认,根据日常检验工作的需要量,挑取纯菌落转接平 板,作为工作用菌种;同时,结合菌种的代数和最长保存期限,挑取纯菌 落制成菌悬液,”的方法制备甘油冷冻管数支,作为传代用菌种。
无菌操作,使菌株不死亡,不污染、不丢失。同时实验人员也要采取 有效的预防措施进行白我保护,如工作时必须穿工作服,佩带无菌手套, 实验完成以后消毒实验进行的区域、实验仪器和器具。如发生意外,如菌 种泄漏或人员受伤,应立即向主管报告以便及时进行处理。
3菌种的保管
, 并输入电脑以电子版形式
升品协谊
存档,以便查找。菌种上应贴上明显的标签,标明名称、培养基、保种人、 日期、编号等。菌种设专人加锁保管,并对所保存的菌种建立〈〈菌种保存、 领用登记台账》(附表3)。

在菌种的保存期间,应每天检查保存菌种冰箱的温度、菌种管的塞子 是否松动或生霉,如有异常应及时处理。
,不能随意转让其他单位和个人,需要时应有单位证明和 批准手续以及李爱科组长签字方可供应。
4菌种的领用与使用
,需到主管领取工作用菌种或传代用菌种, 同 时填写〈〈菌种领用登记台账》相关内容。
, 用于日常检验或验证 试验,使用后及时填写〈〈菌种使用登记台账》(附表6),以便追踪菌种使用 历史。
5菌种(废弃)的销毁
下列情况的菌种或培养物或被污染的器具等,必须采用 121 C、45分
钟湿热灭活处理:新一代菌种制备成功后的上一代菌种;使用完后的菌种 和带有标准菌种的器具和培养物;超过有效期的菌种;凡被污染、变异、 可疑等异常情况菌种;其他应废弃的菌种。
6附则
附表1:〈〈检定菌接收记录》
附表2:〈〈检定菌种传代、分离记录》
技品协谊
附表3:〈〈检定菌种保存、领用登记台账》
附表4:〈〈检定菌种观察记录》
附表5:〈〈检定菌种鉴定记录》
附表6:〈〈检定菌种使用登记台账》
附表7:〈〈废弃菌种(物品)销毁处理记录》
菌种资源详细信息(密)
此项信息不对外公布,保存核心成员手中。
菌种登记:编号+详细名称+来源+特性+动物实验+ ,随时补充,
留照片。
专品
附表1:〈〈菌种接收记录》
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国种接收记录
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