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实验报告
实验名称:
班级:
实验人:
实验时间:
研究背景与目的：掌握还原糖含量测定的方法之一的3,5■二硝基水杨酸比色法，熟悉722分光光度计的主要用途、工作原理及使用流程。
实验原理：已知在植物体内含有一定量的还原糖，利用还原糖的还原性，使其与3, 水杨酸反应，生成有吸光性的3-氨基-5硝基水杨酸。在某浓度范I制内，该物质在540mn F 的光吸收与还原糖含量成正比，通过测定该物质的消光值，查对标准曲线，便可得样品中还原糖含量。
仪器与试剂：722光栅分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）
电热恒温水浴锅（型号：双列八孔标号：09035天津市中坏实验电炉有限公
司）
电磁炉架盘天平具塞刻度试管移液器容屋瓶烧杯研钵漏斗
151111*9
lOOul—lOOOul
100nil*9
2mg/nil葡萄糖标准液
10mg/nil 3,5■二硝基水杨酸溶液
蒸馆水
实验步骤：
1. 标准曲线的制作
取7只15ml具塞刻度试管,编号,分别加入葡萄糖标准液0、、、、、、亳升，然后用移液器向各试管加蒸饰水，，摇匀，再各加入3,5■二硝基水杨酸溶液1亳升，摇匀，在沸水浴中准确加热5分钟，取出冷却至室温，用蒸馆I水桶释至15毫升混匀，用分光光度计在540mn卜•测定消光值。以消光值为纵坐标，葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。
2. 植物样品中还原糖的提取
将植物样品一苹果称取lg放入研钵中，加入少量石英砂，磨成匀浆，转移到100亳升容量瓶中，用蒸馆水少量多次地清洗研钵，再将洗液转移到容量瓶中，至70-801111,摇匀，置于 80度恒温水浴中浸提半小时，其间摇匀数次，是还原糖浸出。
3. 还原糖含量的测定
待上述提取液冷却到室温，过滤，滤液达十几亳升即可，取滤液1亳升放入15ml具塞刻度试管中，加入1亳升3,5-二硝基水杨酸溶液，摇匀后在沸水浴中准确加热5分钟，取出冷却后桥释到15亳升。使用722分光光度计测定OD540值。（作两个重复组取平均值）。
数据整理与计算：
标准曲线
浓度mg/ml
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
浓度
mg/ml
0. 0000
0. 0133
0. 0400
0. 0667
0. 0933
0. 1200
0. 1333
0. 0531
0. 0525
吸光度
0. 000
0. 063
0. 254
0. 456
0. 658
0. 839
0. 941
0. 354
0. 350
从标准曲线中查出样品的OD540值对应的还原糖量A (mg/ml),然后按下列公式计算样品中还原糖含量。
还原糖含量(％)=【A*样品桥释总体积(ml) / (样品重*1000)】 *100%
将数据代入公式，得
(1) 还原