文档介绍：结核分枝杆菌核酸检测是检测结核分枝杆菌特异的核酸序列；
阳性结果提示该检测结核分枝杆菌核酸的存在，在排除核酸污染的情况下，可确定该检测标本中存在结核分枝杆菌。
结核分枝杆菌核酸检测较常采用的目的片段有16SrRNA、IS6110、MBP64、rpoB、hsp65等
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结核分枝杆菌核酸检测
增加分子生物学阳性可以作为确诊标准，及强调病原学检查的重要性。
分子生物学检查
结核分枝杆菌核酸检测阳性。
4 诊断原则
肺结核的诊断是以病原学（包括细菌学、分子生物学）检查为主，结合流行病史、临床表现、胸部影像、相关的辅助检查及鉴别诊断等，进行综合分析做出诊断。以病原学、病理学结果作为确诊依据。
确诊病例
结核分枝杆菌核酸检测阳性，及胸部影像学检查支持即可确诊。
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常用技术
传统实时荧光定量PCR检测
半巢式全自动实时荧光定量PCR检测
环介导等温扩增检测
实时荧光核酸恒温扩增检测
交叉引物恒温扩增检测
基因探针检测
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抗酸染色
每张检查3-5min或更长时间→阳性率低因素之一
荧光染色
%
or NTB

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结核菌需要先培养出来（2-6周）
再加入不同浓度抗菌药物的培养基中继续培养4-8周报告药敏结果
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2014年WHO关于结核诊断的标准
肺结核
所有患者，包括儿童，当疑似肺结核并可咳痰时，应送2份痰做涂片镜检或 1份痰做Xpert MTB/RIF检测
对于涂阴疑似肺结核患者，应当使用Xpert MTB/RIF 或培养进行诊断
耐药结核
当患者具有耐药结核的风险，或者合并HIV感染，或者病情严重时，应使用Xpert MTB/RIF做初始诊断；
肺外结核
所有患者，包括儿童，怀疑有肺外结核时，应当采集相应的样本进行微生物学和组织学检查；优先推荐使用Xpert MTB/RIF 做初始诊断
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GeneXpert
Xpert MTB/RIF
一种半巢式实时荧光PCR体外诊断技术，可以检测结核分枝杆菌以及利福平耐药性；
针对rpoB基因81bp利福平耐药核心区间（RRDR）设计引物、探针。5个探针结合到野生型，而不是突变体目标。每个探针用不同的荧光染料标记，允许同时检测。
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痰标本与处理液
1：2混合
吸取2ml处理样品
到反应盒
将反应盒放入检测模块（手工操作完成）
标本自动
清洗过滤
超声裂解
DNA提纯
DNA和PCR反应试剂混合
半巢式实时荧光定量核酸扩增检测
打印检测报告
获得检测结果时间：1小时50分钟
系统内自动完成
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INH单耐药的患者通常不会考虑立即改变治疗方案，与此相反，对RIF单耐药的患者，无论INH是否耐药，都会采取与耐多药患者相同的治疗方案1。 
约90%利福平耐药的结核患者同时异烟肼耐药，也就是耐多药结核患者2。
Sven O. Friedrich et al,. Suitability of Xpert MTB/RIF and Genotype MTBDRplus for Patient Selection for a Tuberculosis Clinical Trial. Journal of Clinical Microbiology. 2011 (49):2827-2831.
Xichao Ou et al. A feasibility study of Xpert MTB/RIF test at the peripheral level laboratory in China. International Journal of Infectious Diseases. 2015 (31):41-46.
MTB/RIF检测对MDR-TB的防控
“结核+利福平耐药”对多耐结核控制产生的效果最为显著。即便补充异烟肼耐药，能提升的效果有限。
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环介导等温扩增仪（TB-LAMP）
体外定性检测结核分枝杆菌复合群；
在恒温条件下进行基因扩增反应；
4种引物识别6个区域，特异性高；
扩增反应效率高，67℃，40min。
主要优点在于对实验室仪器的依赖程度较小，而且试剂成本较低。
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