文档介绍：第三军医大学
硕士学位论文
rhscIL-12转染人树突状细胞的免疫效能研究
姓名:王月和
申请学位级别:硕士
专业:外科学(普外)
指导教师:余佩武
20030501
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一——H救耸魍蛔聪赴拿庖咝苎芯摘要苎三至匡奎兰堡主堂垡堡茎一相互关系、观察蜃H綝对特异性拍细胞发育、分化,及特异性珼蚱湓诳怪琢雒庖咧械闹匾W饔枚晌6性肿瘤生物治疗研究热点之一。诳怪琢雒庖叻从χ蟹置诖罅堪紫赴樗.:既促进赴置诟扇潘豗作用,又诱导騎分化【“。这是し⒖怪琢雒庖叩闹饕;,抗原提呈功能降低,甕分泌减少,,这可能是机体异质化细胞得以逃遁、成瘤、转移和复发的主要原因之一【。作为诱导肿瘤特异性免疫应答的主要细胞因子之一,,但由于严重的不良反应限制其推广【浚绻其基因导入免疫细胞使其自行分泌,,有利于免疫反应的激发和维持,又可减少局部或全身直接应用不良反应。具有免疫活性吧的是由两个不同基因和编码的造成停蚱渫炊厶濉緋烤赫杂雙特异性受体结合,反而阻断了以期既提高谋泶镉挚杀苊鈖或的潜在威胁【俊S纱耍颐巧柘牍菇ㄖ组人单链白细胞介素组体,并将其与真核表达载体再重组。将一基因导入云诰勒庵忠斐;蛘蚣忧緿的免疫功能,强化机体的细胞免疫,观察H綝免疫效能的改变,为转基因怪琢疫苗的临床应用提供理论依据。方法:构建—和逆转录病毒载体的重组体,脂质体介导转染人外周血来源结果:—和逆转录病毒构成的重组体可转染真核细胞,.在宿主细胞内有效表达;被感染细胞内无病毒复制;,来源于人外周血的单个核细胞发育成为高表达的饩岛偷缇倒鄄炀目的:树突状细胞琁—发挥抗肿瘤两个亚单位以簂比例构成的异二聚体蛋白分子V匾5氖牵琾过量表达生物学活性的发挥。将蚿重组到同一载体的同一启动子的下游并导入訥狢、一蚑盏肌⑴嘌H鞠赴粤魇较赴恰和治鱿赴硇透谋洹和甕表达以及也一和猋在细胞免疫反应中,.闹导和功能的影响薄
调泊碳し肿颖泶铮銮緿对赴脑鲋匙饔茫盏糃同时騨有典型形态,流式细胞仪动态观察其表型显示,早期饕1泶顲孀臘高訲细胞的刺激能力,大量促进赴鲋巢⒎只狢;同时诱导只琓分泌大量猋从而发挥其抗肿瘤作用。结论:逆转录病毒载体是体外转染氖籽≡靥逯唬籸肽孀B疾《分化,加强机体抗肿瘤免疫效应:在蠭的产生与来源于谠葱约福的成熟,其表达上调:一转染徊缴系鱀的表达,提构建的重组体是用猩镏瘟朴行Э尚械氖侄危籸逋庾H綝能上呈正相关,而与外源性的尴喙匦浴关键词:·树突状细胞逆转录病毒载体基因转染第三军医大学硕士学位论文
一转染人树突状细胞的免疫效能研究言前悄壳胺⑾值墓δ茏钋康目乖岢氏赴苌闳⒓庸ず吞岢士乖⒛高水平表达共刺激分子和粘附分子而促进自身与赴慕岷希碳こ跏夹蚑细胞增通过血管内皮屏障而迁移至肿瘤部位,。在抗肿瘤免疫反应中,擞盏糡细胞转化成猓珼还通过分泌大量—诱导騎分化,同时抑制騎分化,这是斡肟肿瘤免疫的主要机制之一嘲。,疶分化发生偏移,则机体的细胞免疫功能异常,免疫监视和免疫排异无能,这可能是机体异质化细胞得以逃遁、异常或正向加强墓δ埽炕宓南赴庖摺—作为诱导肿瘤特异性免疫应答的主要细胞因子之一,虽然在局部或全身应有较大的不良反应限制其临床应用。如果将虻既朊庖呦赴蛊渥孕蟹置冢这样在肿瘤局部形成一个高浓度、长时间的分泌奈⒒肪常欣诿庖叻从Φ激发和维持,同时减少全身应用一的不良反应。构建一基因的单链重组体主要优势还在于儿一本身结构的特殊性。天然的儿怯蓀和礁鲅堑ノ灰是几一分子生物学的一个显著特点嘲。更为重要的是,只有当蚿同时表达物学效应,如果ヌ灞泶锵喽怨浚琾单体或可竞争性与特异性受体结合,反