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分-子-生-物-学实验报告.pdf

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文档介绍:分-子-生-物-学实验报告
分 子 生 物 学




2011 级生物科学师范
组长:
组员:
从甘薯中克隆 ADK 基因的核心片段
(西南大学生命科学学院,重庆 400715)
摘要:甘薯为我国农业主要栽培作物,并且是分子生物学实验室常见材料,本次实验主要
以甘薯叶片(部分为茎)为实验材料,第一次实验从材料中提取 RNA 并反转录 cDNA 第一链,
经 PCR 扩增得到大量 ADK 基因核心片段,电泳检测胶回收 ADK 基因核心片段,将其与 T 载
体相连并导入大肠杆菌 DH5感受态细胞中,扩增之后在加有相应抗生素的 LB 平板上筛选阳
性克隆,这对后续生物信息学分析等有重要意义。第二次实验是用 CTAB 法提取甘薯 DNA,PCR
扩增再凝胶电泳检测纯度。(提取 DNA 也能扩增出 ADK 基因核心片段)
关键词:甘薯、PCR 技术、腺苷酸激酶片段(ADK)、基因克隆、转化
Abstract: Sweet potato for my agricultural main cultivation crop, and is molecular
biology laboratory common material, this times experiment main to sweet potato
leaves (part for stems) for experiment material, first times experiment from
material in the extraction RNA and reverse recorded cDNA first chain, by PCR spread
increased get large ADK gene core fragments, electrophoresis detection rubber
recycling ADK gene core fragments, will its and t carrier connected and import
Escherichia coli DH5 (feel State cell in the, spread increased in plus has
corresponding antibiotics of LB Tablet Shang filter positive clone This importance
to subsequent bioinformatics analysis. The second experiment was extracted by CTAB
method DNA,PCR amplification and gel electrophoresis and purity of sweet potato.
(Extraction of core fragment of DNA can be amplified ADK gene)
key words: sweet potato; PCR technologies; Adenylate Kinase Gene( adk ); gene clone;
transformation
1. 综述
甘薯
甘薯(Ipomoea batatas (L. ) Lam.)属旋花科(Convolvulaceae)甘薯属((Ipomoea)蔓生
一年生草本植物,染色体数为 2n=6x=90。其又名山芋、红芋、番薯、红薯、白薯、地瓜、
红苕等,因地区不同而有不同的名称,经济价值较高可食用也可入药。
世界甘薯主要产区分布在北纬 40°以南。栽培面积以亚洲最多,非洲次之,美洲居第 3
位。1994 年世界甘薯总面积为 938 万公顷,总产量为 万吨。甘薯是我国的主要栽
培作物,常年种植面积 6×106hm2 左右,栽培面积和总产量均居世界首位,它所富含的淀粉
是重要的轻化工和食品加工原料。
选育推广优良品种是农业增产的重要措施,因此,在农业科技工作中,选育和推广优
良品种始终处于重要地位,“渝苏 303”是西南师范大学在育成“渝苏 1 号 ”、“渝薯 34”、
“渝薯 20”