文档介绍：第一军医大学
硕士学位论文
尖吻蝮蛇毒中抗凝组分Acoagulatin的抗血栓活性研究
姓名:李婷
申请学位级别:硕士
专业:药理学
指导教师:吴曙光;朱正光
20040510
中英文对照词表蘩一军医夫学磺士学位论文羧甲基琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶电泳十二烷墓巯酸镄蝗腔谆;淄离散液楣色谱每分钟转速二胺乙基譬终维蛋囊嚣嫩壤盐水凝凝叙辩闻凝皿酶时间凝肌活酶时间溪纯罄分凝矗游酶辩阗二磷酸腺苷贫衄小板瀵尔镶钟桁嗾赝琋,琋一四甲基乙二胺竞密度出巍时间赛瓶小板蛋白况甋
尖吻蝮蛇毒中抗凝组分目寡Kɑ钚匝芯中文摘要:第一军医大学硕士学位论文蛇毒中富含各种作用于凝血系统诸多环节的蛋白酶和多肽,这些多肽和蛋白质在抗凝、抗血栓和止血等方面都有广泛的应用。本研究从中国产尖吻蝮蛇蛇毒中发现~分子量为,的抗凝活性蛋白组分,并对其理化性质和抗血栓活性作用进行了研究。根据实验目的,本研究的实验分为两个部分:⒓馕球笊叨局锌鼓榉謅的纯化鉴定及其理化性质的研究交换柱层析对尖吻蝮蛇蛇毒进行了分离纯化。,收集虎畔赐逊宓母髯榉郑直鸾ǜ髯榉滞ü∈缶脉注射给药。用剪尾法测定小鼠尾静脉出血时间,并将各个组分分别注射小鼠背部皮肤观察是否有出血毒性。实验结果表明,所收集的欧组分可以显著延长小鼠静脉出血时间,同时无出血毒性,即对Ⅱ遄鼋一步分离纯化。层析柱中,进行梯度洗脱,收集分离纯化出的虎艉欧涞母髯榉郑直鸾占母髯榉中∈缶猜鲎射,剪尾法测定出血时间,并分别注射小鼠背部皮肤观察有无出血毒性,同时对收集各组分进行类凝血酶活性测定,另外将抗凝全血中,对各组分进行抗凝活性测定,持续观察∈保ü鄄血液是否凝固而确定该组分是否具有抗凝作用,发现其中欧寮饶苎长小鼠出血时间及,又无明显的出血毒性和类凝血酶活性,是一种安全、有效的无类凝血酶活性的尖吻蝮蛇蛇毒抗凝组分,即收集欧灞纯化,成功地纯化出这一新的抗凝组分,并命名为为了进一步鉴定该组分的纯度,经高效液相色谱进行纯度采用两种离子将寮尤隒畇加入到经过。两步分离鉴定,结果显示其为一对称单峰,主成分相对百分含量为.%,具和用。和.
将浓度为豨/山、/皿、瘢降腶的溶液牛痥/两个剂量家兔耳缘静脉给内实验。第一军医大学硕士学位论文有较高的纯度。同时采用甈缬径詀进行分子量测定%浓缩胶,,%分离胶,,电极缓冲液为的一甘氨酸缓冲液航峁允荆翰獾酶弥治镏实姆肿恿课,由两个亚基组成,分子量分别为,⒓馕球笊叨局锌鼓榉謅的抗血栓活性研究在目寡Kㄑ芯恐校颐侵饕=辛颂逋馐笛楹投锾一、体外实验⑻逋饪鼓笛椋篢在体外分别与抗凝兔血浆混匀,在型血凝仪进行抗凝实验,结果表明苑从衬凇⑼庠茨;钚缘腜显著的延长作用,但对没有影响。⑾巳芑钚圆舛ǎ核庀宋鞍自缬尽⑾宋鞍灼桨迨笛为了观察欠窬哂邢巳苄裕兴庀宋鞍自缬竞纤维蛋白平板实验,结果表明宦凼嵌∈焙蟮南宋鞍平板还是水解纤维蛋白原电泳都无影响,说明该抗凝组分具有纤溶性,同时也不能在体外水解纤维蛋白原。⑻逋庋P“寰奂笛将浓度为龋豯、,在血小板凝集仪上进行笰和胶原诱导的血小板聚集实验。结果表明匝P“寰奂挥邢灾霓卓棺饔谩二、动物实验:⒖,即可明显的减少大鼠腹腔静脉血栓的湿重和干重,有效地抑制静脉血栓的形成。⒖辜彝枚鲅Kㄊ笛椋抗凝组分和,。’
第一军医大学硕士学位论文药,能显著地抑制家兔颈动脉血栓的形成。⑷D淌奔涫笛閒】:.豨/甮/三个剂量小鼠鼠尾静脉给药,可以显著延长小鼠眼球后静脉的凝血时间。脉给药,可以在分钟到∈敝溆行У难映ぜ彝枚醒攵龅哪通过小鼠背部皮下注射/.鄄煳廾显的出血毒性反应,说明且恢志哂幸欢ò踩缘纳叨究鼓⑿∈笫笪渤鲅J奔鼠尾静脉给药,剪尾法测定小鼠鼠尾静脉的出血时间,发现痥痥礁黾亮孔榭梢杂行У难映ば∈笪簿猜龅某鲅J奔洹上述结果表明,湖南产尖吻蝮蛇毒冻干粉经过—离子交换柱层析,获得的抗凝组分且恢值ゴ康摹⒂闪礁鲅腔槌傻牡慕洗蠓肿恿康目鼓榉郑其分子量为,,但是它体内给药可以安全有效的延长出血和凝血时间,并且具有明显的抗动静脉血栓的作用。同时体外给药对反映内、外源凝血活性的、均有显著的延长作用,但是对没有影响,因此赡苁亲饔糜谀A<斗从餐返脑期,对内源性凝血通路和外源性凝血通路都有作用的一种抗凝组分。关键词:蛇毒尖吻蝮蛇分离纯化出血毒性出血时间凝血时间凝血酶时间凝血酶原时间活化部分凝血活酶时间血栓./、/、¨痥黾亮考彝枚稻⒊鲅6拘允笛椋组分。直鸢凑./、/。/、
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