文档介绍：第三章生物制药的基本技术 Chapter 3 Basic Technique For Biopharmacon 第三章生物制药基本技术生物制药是把生物体内的具有生物活性的基本物质, 保持原来的结构和功能,又能在含有多种物质的液相或固相中较高纯度的分离出来。它是一项严格、细致、复杂的工艺过程,涉及物理、化学、生物学、工程等方面的知识和操作技术。问题: 1、标准化方法? 2、如何发现或研制新药? 对于一个新研制的生物药物,从查阅文献开始,到探索实验、条件考察(记录客观)、总结制定工艺规程、制定分析鉴定方法,再进行中试放大,全面考察工艺是否成熟,是否稳定等。 1、提取法(Extraction) 2、发酵法( Zymotechnics ) 3、化学合成( Chemical synthesize ) 4、组织培养法( Tissue culture ) 5、现代生物技术(Modern Biotechnics ): Gene engineering, Enzyme engineering, Cell engineering , protein Engineering, Fermentation engineering 基本制造方法第三章生物制药基本技术生化制药的六个阶段 1. 原料的选择和预处理 2. 原料的粉碎 3. 提取:从原料中经溶剂分离有效成分,制成粗品的工艺过程。 4. 纯化:粗制品经盐析、有机溶剂沉淀、吸附、层析、透析、超离心、膜分离、结晶等步骤进行精制的工艺过程。 5. 浓缩、干燥及保存 6. 制剂:原料药(精制品)经精细加工制成片剂、针剂、冻干剂、粉剂等供临床应用的各种剂型。第三章生物制药基本技术一. Raw Material Selecting and Pretreatment 原料选择和预处理原料选择的基本准则: 1、在大量的信息资料和实践经验的基础上,选择目标原料。 2、选择有效成分含量高的新鲜材料; 3、来源丰富易得; 4、制造工艺简单易行; 5、成本比较低; 6、原料的采集不破坏生态环境, 选择对环境友好的原材料资源,防止生物入侵。预处理方法: 1、动物组织先要剔除结缔组织、脂肪组织等非活性部分; 植物种子去壳除脂;微生物要进行菌体与发酵液分离等基本操作。便于贮存和运输。 2、冷冻法预处理:有些材料要冷冻保存或低温保存,以便抑制微生物和酶的作用。 3、有机溶剂除去部分水分:用丙酮或乙醇进行脱水和脱脂, 有利于贮存。二、minution of Raw Material 原料的粉碎:在提取前先将大块的原料粉碎或绞碎成适度的粒度,或将细胞破碎,使胞内活性物质充分释放到溶液中, 有利于提取或吸附。动物脏器组织:常用绞肉机机械法粉碎; 植物肉质组织:常用磨碎法; 微生物:常用自溶、冷热交替、加砂研磨、超声、加压等处理方法。 :组织捣碎机、匀浆器、研钵、球磨机、万能粉碎机、绞肉机、击碎机、刨片机。动物组织多在冰冻状态绞碎、溶浆。 A、反复冻融法:把待破碎的样品冷至-20 ℃-15 ℃,使之凝固,然后缓慢的溶解,如此反复操作,大部分动物性细胞及细胞内的颗粒可以破碎。 B、冷热交替法:将材料投入沸水中,在 90℃左右维持数分钟,立即置于冰浴中,使之迅速冷却,绝大部分细胞被破坏。此法多用于细菌或病毒中提取蛋白和核酸。 C、超声波处理法:多用于微生物材料,处理的效果与样品浓度、使用频率有关。用大肠杆菌制备各种酶时,常用 50~100mg/L 菌体浓度,在 1~10KC 频率下处理 10~15min 。操作时注意避免溶液中气泡的存在。 D、加压破碎法:加气压或水压,达 ~ (210~350kgf/cm2) 的压力时, 可使 90% 以上细胞被压碎。多用于微生物酶制剂的工业制备。 3. 生化及化学法: A. 自溶法:将新鲜的生物材料存放在一定的 pH和适当温度下,利用组织细胞中自身的酶系将细胞破坏,使细胞内含物释放出来的方法。自溶的温度, 动物材料在 0-4 ℃,微生物在室温下。自溶时,需加少量的防腐剂,甲苯、氯仿,以防止外界细菌的污染。* 由于自溶时间较长,不易控制,故制造具有活性的核酸和蛋白质时比较少用。