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文档介绍:研究所实****心得体会
动物医学对于每个人的第一感觉就是兽医,这是最为浅显的,如果没有接触 这专业,如果没有去深入了解,也许不懂得这个专业所学的知识,理论在书本中 是很难做到统一与体系的,我有幸能够在学校的研究所实****在那里我学到了理 论以外的许多东西,这就是实践的经验,尽管我们的专业本身就有许多的精品实 验,但是对于我们专业的深入学****仍然是不足的,进入研究所,我一开始以为我 可能会一无是处,自己毕竟学的还不够多,对于血清试验等等更是一窍不通,后 来在老师和学长、学姐的帮助下,我认识了许多仪器,同时也掌握了一些免疫学 知识,而且也提前知道了一些病理病征、药物使用等等。
每次来研究所要记住的第一件事当然就是遵守研究所的纪律。它是一个需要 安静与整洁的环境,因此我们在进入研究所不仅要清理好卫生还要保持它的清 洁,以及实验安静的环境,这样会给实验工作者制造良好的工作环境。
在研究所里接触最多的是血清试验,我们要面对许多猪场老板那里接来的 血,要将血进行入库登记,然后进行分离血清,要保证每一份的血清编码一致, 这要认真小心。在离血时我们要学会离心机的基本操作,对于转速的设置、时间 的设置以及按照要求对温度进行设置,这些设置一般都在转速6000转,时间4 分钟温度至室温,我们将血清分离出来后,要进行记录,记录后放入四摄氏度冰 箱待测。每次所接的客户都要进行客户猪场情况的登记,猪瘟、蓝耳、伪狂犬的 免疫情况,所用的厂家药物等等,还有就是所要求的检测项目,将资料填写齐全 后,就要进行血清检测,检测的血清要使用同一批次的试剂盒,检测要熟悉检测 流程,以下就是猪瘟、蓝耳、伪狂犬的检测原理及流程。
猪瘟:
原理:猪瘟(Classical swine fever, CSF)是由猪瘟病毒引起的猪急性接 触性传染病。本病特征为发病急、高热稽留和细小血管壁变性引发的广泛性点状 出血、梗死和坏死。本病传染性强,死亡率高。检测特异性猪瘟抗体可作为猪瘟 疫苗的免疫监测及该病辅助检测指标。
本试剂盒采用ELISA方法检测猪血清中的特异性猪瘟抗体。本试剂灵敏度 高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。
操作流程:(2号液) 按1: 10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馅水或去离子水充分混匀即为工作 洗涤液。
样本稀释 用样本稀释液(5号液)将待检血清样本按1: 40稀释,如取 5ul样本与195ul样本稀释液,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。
加样反应 每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孑L (分别加 入阴性、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本 lOOulo 37°C避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3 次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。
加酶反应 除空白对照孔外,每孔加酶结合物(1号液)1滴。37°C避光 反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
显色反应 加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37°C避 光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄 色)并判读结果。
结果判断:阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。 以空白对照调零,用酶标仪于450nm (63