文档介绍：中国农业科学 2009,42(11):3804-3811
Scientia Agricultura Sinica doi: .0578-
应用 RNA 干扰技术创造低脂肪氧化酶活性大豆新种质
马建,张君,曲静,王云鹏,魏益凡,王丕武
(吉林农业大学农学院生物技术中心,长春 130118)
摘要:【目的】通过 RNA 干扰技术抑制大豆籽粒中脂肪氧化酶基因表达,改良大豆品质,创造优良大豆新种
质,探索大豆品质育种新途径。【方法】采用 RT-PCR 技术克隆大豆籽粒脂肪氧化酶基因(Lx1、Lx2、Lx3)核心保
守序列 357 bp片段,通过重组 PCR 构建大豆脂肪氧化酶基因 RNA 干扰表达载体,利用花粉管通道法转化大豆品种
吉农 18。【结果】获得了12 个转基因株系,其中 10 个株系发生明显变化,SDS-PAGE 电泳和脂肪氧化酶活性测定
表明转基因植株籽粒中脂肪氧化酶活性明显降低,平均减低 %;经近红外谷物分析仪测定,转基因植株脂肪
含量平均提高 %~%,总蛋白含量降低 %~%;RT-PCR 结果表明转基因株系中脂肪氧化酶 mRNA 积累受
到明显抑制。转基因植株 2 代及 3 代检测结果表明,转基因植株脂肪氧化酶活性均明显降低,脂肪含量均有所提
高。【结论】应用 RNA 干扰技术可有效的抑制大豆籽粒中脂肪氧化酶基因表达,降低脂肪氧化酶活性,提高大豆油
份含量,改良大豆品质,创造优良大豆种质。
关键词:大豆;种质资源;脂肪氧化酶;RNA 干扰;重组 PCR

Development of Novel Soybean Germplasms with Low Activity of
Lipoxygenases by RNAi Method
MA Jian, ZHANG Jun, QU Jing, WANG Yun-peng, WEI Yi-fan, WANG Pi-wu
(The Biology Center of Agronomy College, Jilin Agricultural University, Changchun 130118)

Abstract: 【Objective】 The objective of this study was try to find a new avenue of breeding technique in soybean to improve
the quality of soybeans and create new superordinary germplasm resource of soybeans by RNAi, which prohibits the gene expression
of lipoxygenase in soybean seed. 【Method】 The consensus sequence of lipoxygenase gene (Lx1, Lx2, Lx3) in soybean seeds was
cloned by RT-PCR, the length of t