文档介绍：甲基对硫磷降解菌的分离鉴定及水解酶基因克隆表达
摘要
4-5
Abstract
5
1. 引言
9-18
     农药与环境污染
9
     有机磷农药的使用现状及中毒机理
9-10
     微生物降解有机磷农药的研究进展
10-17
         降解有机磷农药的微生物种类及筛选
10-12
         微生物降解有机磷农药的降解机理与代谢途径
12-13
         影响农药降解的因素
13-14
         有机磷农药降解酶基因的克隆
14-15
         降解酶的特性研究及工程菌的构建
15-17
     本文研究的目的和意义
17-18
2. 实验材料与方法
18-28
     实验材料
18-20
         菌株和质粒
18
         药品和试剂
18
         主要仪器和设备
18-19
         培养基与试剂配制
19
         常用缓冲液
19-20
     实验方法
20-28
         菌株的富集培养及分离纯化
20
         形态观察和生理生化鉴定
20
         基因组DNA的提取
20-21
         细菌16S rDNA的PCR扩增
21
         菌株HS-D36对甲基对硫磷的降解特性研究
21-23
         菌株HS-D36反硝化能力的测定
23-24
         DNA片段的连接转化
24
         细菌质粒的提取
24
         DNA限制性内切酶消化
24-25
         DNA片段的回收
25
         甲基对硫磷水解酶基因(mpd)的克隆
25
         原核细胞中重组质粒的筛选
25-26
         MPD蛋白的原核表达及表达产物的SDS-PAGE分析
26
         重组甲基对硫磷水解酶MPD的初步研究
26-28
3. 实验结果
28-43
     甲基对硫磷菌株的分离和鉴定
28
     形态观察及生理生化鉴定
28-30
         降解菌形态观察
28-29
         降解菌的生理生化鉴定
29-30
         菌株的生长曲线的测定
30
     降解菌16S rDNA的鉴定
30-32
         降解菌基因组DNA的提取
30-31
         降解菌的16S rDNA的测序
31-32
         降解菌的系统进化分析
32
     菌株降解性能分析
3