文档介绍：细胞凋亡与检测方法
汇报人:
•、细胞的死亡方式
n
凋亡(apoptosis):机体在正常生理或
病理状态下发生的一种自发的、程序化
的死亡过程。
坏死(Necrosis):各种致病因子，干扰和中和了细胞的正常代谢活动，造成细胞的意外死亡。
二、细胞坏死与凋亡的比较________
坏死
凋亡
性质
病理性、非特异性
生理性或病理性，特异性
诱导因素
强烈刺激，随机发生
较弱刺激，非随机发生
生化特点
被动过程，无新蛋白质合成，不耗能
主动过程，有新蛋白质合成，耗能
DNA电泳
弥散性降解，电泳呈均一DN*** 状
DN***段化(180—200 bp),电泳呈“梯”状条带
形态变化
细胞结构全面溶解、破坏、细胞
肿胀 Q0CII
胞膜及细胞器相对完整细胞皱缩，
核 m ' ■
炎症反应
溶酶体破裂，局部炎症反应
溶酶体相对完整，局部无炎症反应
凋亡小体
无
有
基因调控
细胞?
有
三、细胞凋亡的生理意义
1.
2.
3.
确保正常发育、生长
如：指（趾）间隙的形成
维持内环境稳定
如：清除受损、突变或衰老的细胞发挥防御功能
如：使受到病毒感染的细胞凋亡
四、倜亡时细胞旳王安处化
（一）形态学改变
初期:
细胞变岡微绒毛消失胞质浓缩
核染色质高度浓缩凝集在核周边，辺佳细胞体积缩小
中期:
胞膜内陷
浓缩核裂解膜自行分割
• 0
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扣
后期:
邻近的上皮细胞、MC、瘤细胞等吞噬凋1、：小体
Normal Cell
、、号*
Apoptotic cell
（二）、生化改变
1、DN***段化一主要特征
2、内源性核酸内切酶（Dnase）激活
3、凋亡蛋白酶（Caspases）激活
内源性核酸内切酶的作用
核心颗粒连接区
五、细胞凋亡的检测方法
1、形态学检测
• （一）HE染色（凋亡细胞呈圆形，胞浆红染，细胞核染色质聚集成团块状）
•（二）透射rnm
•（三）荧光显微镜观察
透射电镜观察
control
stage Ila
凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。凋亡I期
(pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕，出现许多称为气穴现象
(cavitations)的空泡结构(图2)； II a期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；细胞凋亡的晚期，细胞核裂解为碎块, 产生凋亡小体。
pro-apoptosis nuclei（ 1 期）
图2电子显微镜观察Jurkat细胞凋亡过程屮核染色质的形态学改变