文档介绍：总糖和还原糖的测定班级: 2013 级生科三班姓名:高超学号: 201300140020 名称:生化实验同组者:樊晓航一,实验目的: 1 ,掌握还原糖和总糖的测定原; 2 ,学****用 3, 5- 二硝基水杨酸法测定还原糖的方法。二,实验原理: 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或***基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖 10257 RP 麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物, 3,5- 二硝基水杨酸则被还原为橘红色的 3- 氨基-5- 硝基水杨酸。在一定范围内, 还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计, 在 540nm 波长下测定光密度值, 查对标准曲线并计算, 便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时, 每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以。三,实验器材与试剂所需器材: 1, 玻璃刻度比色管: 25mL ×9只 2 ,吸管 2ml × 2,5ml ×1 3, 水浴锅,电炉 4 ,紫外可见分光光度计 5 ,容量瓶× 100ml 6, 漏斗 7 ,比色皿所需试剂: 1 ,标准葡萄糖溶液( ) 2,3,5- 二硝基水杨酸( DNS0 试剂 3 ,西瓜汁液:新鲜西瓜切开后用手捏出的汁液,过滤后得到的四,实验步骤: 1 ,用移液管取 3ml 西瓜汁液,加蒸馏水定容至 100ml 备用。 2,取9 只玻璃比色管( 25ml) 按下表加入试剂, 混匀后, 全部沸水浴 10min 取出后用自来水冷却至室温。( 以下所用单位皆是 ml) 编号 012345678 标准液蒸馏水西瓜汁液 3 ,冷却后全部加蒸馏水