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3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定还原糖.doc

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3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定还原糖.doc

上传人:xxj16588 2016/6/16 文件大小:0 KB

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3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定还原糖.doc

文档介绍

文档介绍:3,5 -二硝基水杨酸比色法(DNS 法) 3,5 -二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,再一定范围内,还原糖的量与反应液的颜色强度成比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。次法是半微量定糖法, 操作简便、快速, 杂质干扰较少, 是一种很好的糖定量测定方法。 1. 3,5 -二硝基水杨酸试剂(DNS 试剂) 甲液-溶解 克结晶酚( 苯酚)于 毫升 10 %氢氧化钠中, 并稀释至 69 毫升, 再此溶液中加入 克亚硫酸氢钠。乙液-称取 255 克酒石酸甲钠,加到 300 毫升 10 %氢氧化钠中,再加入 880 毫升 1% 3,5 - 二硝基水杨酸溶液。将甲液和乙液相混合即得黄色试剂,保存于棕色试剂瓶中,在室温下放置 7- 10 天后使用。 2. %葡萄糖标准液准确称取 100 毫克分析纯的葡萄糖(预先在 105 ℃干燥至恒重) ,用少量蒸馏水溶解后定容至 100 毫升,保存于冰箱备用。三. 制作标准曲线取9 支大试管,分别按表一顺序加入各种试剂。表一空白 12345678 含糖总量( 毫克)0 葡萄糖液( 毫升)0 蒸馏水( 毫升) DNS 试剂( 毫升) 加热均在沸水浴中加热 5 分钟冷却立即用流动冷水冷却蒸馏水( 毫升) 光密度() 将上述各管溶液混后,在紫外可见分光光度计上用绿色滤光片(520nm) 进行比色测定,用空白管溶液调零,记录光密度值。以光密度值为横坐标,以葡萄糖浓度为纵坐标,绘制标准曲线。四. 定糖管号数量项目根据所取