文档介绍：实验 82 糖的呈色反应和还原糖的检验一、实验目的 1. 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。 2. 了解鉴定还原糖的方法及其原理。二、实验原理糖经浓无机酸处理, 脱水产生糠醛或糠醛衍生物。戊糖形成糠醛, 己糖则形成羟甲基糠醛。这些糠醛和糖醛衍生物在浓无机酸作用下, 能与酚类化合物缩合生成有色物质。与一元酚如α一萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质,反应式如下: 通常使用的无机酸为硫酸。如用盐酸,则必须加热。常用的酚类为α一萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚和间苯三酚等, 有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物和一些嘧啶类化合物等。有人认为,用浓硫酸作为脱水剂时,形成有颜色的产物与酚核的磺化有关,见如下反应式; (一)糖的呈色反应 1. Molish 反应(α~萘酚反应) 本实验是鉴定糖类最常用的颜色反应。糖在浓酸作用下形成的糠醛及其衍生物与α一萘酚作用,形成红紫色复合物。在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。此外, 各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似的阳性反应。因此, 阴性反应证明没有糖类物质的存在; 而阳性反应, 则说明有糖存在的可能性, 需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。 2 .蒽酮反应糖经浓酸水解, 脱水生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10 一酮一 9, 10 一二氢蒽) 反应生成蓝一绿色复合物。 3. Seliwanoff 反应( 间苯二酚反应) 该反应是鉴定酮糖的特殊反应。在酸作用下, 己酮糖脱水生成羟甲基糠醛。后者与间苯二酚结合生成鲜红色的化合物,反应迅速,仅需 20— 30s 。在同样条件下,醛糖形成羟甲基糠醛较慢。只有糖浓度较高时或需要较长时间的煮沸, 才给出微弱的阳性反应。蔗糖被盐酸水解生成的果糖也能给出阳性反应。 4. Bial 反应( 甲基间苯二酚反应) 戊糖与浓盐酸加热形成糠醛,在有 Fe 3+ 存在下,它与甲基间苯二酚( 地衣酚) 缩合, 形成深蓝色的沉淀物。此沉淀物溶于正丁醇。己糖也能发生反应, 但产生灰绿色甚至棕色的沉淀物。(二)还原糖的鉴定含有自由醛基(一 CHO) 或酮基(>C==O) 的单糖和二糖为还原糖。在碱性溶液中, 还原糖能将金属离子( 铜、铋、汞、银等) 还原,糖本身被氧化成酸类化合物,此性质常用于检验糖的还原性,并且常成为测定还原糖含量的各种方法的依据。 1. Fehling 反应费林试剂是含有硫酸铜与酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热, 则生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。上述反应可用下列方程式表示: 在碱性条件下, 糖不仅发生烯醇化、异构化等作用。也能发生糖分子的分解、氧化、还原或多聚作用等。由这些作用所形成的复杂混合物具有强烈的还原作用, 因此企图用简单的氧化还原作用来写出反应平衡式是不可能的。为了防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀, Fehling 试剂中加入酒石酸钾钠,它与 Cu 2+ 形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子,该反应是可逆的。平衡后溶液内保持一定浓度的氢氧化铜。费林试剂是一种弱的氧化剂, 它不与酮和芳香醛发生反应。 2. Benedict 反应 Benedict 试剂是 Fehling 试